方法名称： |
制何首乌—大黄素的测定—HPLC-UV |
应用范围： |
用于制何首乌中大黄素含量的测定 |
方法原理： |
本品粗粉加甲醇回流提取，经液相色谱仪分离，在437nm处测定峰面积，以外标法计算含量。 |
仪器设备及实验条件： |
仪器设备 Waters高效液相色谱仪；2996紫外检测器。 色谱条件 色谱柱：Kromail C18柱（250mm×4.6mm，5μm；流动相：乙睛-水-冰醋酸(60：40：1)；检测波长：437nm；柱温：35℃；流速：1.0mol·min-1；进样量：20μL。 |
试样制备： |
对照品溶液制备 精密称取大黄素对照品7.95mg置100ml量瓶中，加甲醇使溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。 供试品溶液的制备 取制何首乌粉末3g(过四号筛)，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加人甲醇50ml，密塞，称定重量，加热回流30min，放冷，称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取滤液25ml， 减压回收至干，残渣加水20ml，盐酸2ml及三氯甲烷20ml，加热回流30min，放冷，分取三氯甲烷层，水层再用三氯甲烷振摇提取3次，每次10ml，合并三氯甲烷液，减压回收至干，残渣加甲醇使溶解，定量转移至25ml量瓶中，并用甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液。 |
操作步骤： |
精密吸取对照液以及供试品溶液2OμL，分别注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定峰面积，计算大黄素含量。 |
附件： |
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备注： |
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参考文献： |
叶玉华，雷德卿，黄胜春等. HPLC法测定制何首乌中大黄素的含量. 中国药师.2007，10（8)：793～794 |
