方法名称: |
火绒草—咖啡酸和原儿茶醛的含量测定—HPLC-UV |
应用范围: |
用于火绒草中咖啡酸和原儿茶醛含量的测定 |
方法原理: |
本品经5%甲酸的甲醇超声提取,经液相色谱仪分离,在280nm(13min以前)和323nm(13min以后)处测定,以外标法计算咖啡酸和原儿茶醛的含量。 |
仪器设备及实验条件: |
仪器设备 Aglient 1100高效液相色谱仪; 色谱条件 色谱柱:Alltech alltima C18 (4.6mm×250mm,5μm);流动相: 甲醇-0.05% 磷酸水溶液(25∶75);流速: 1.0 ml·min-1;检测波长: 13min 以前为280nm,13min 后为323 nm;柱温:25℃。 |
试样制备: |
对照品溶液制备 精密称取二苯乙烯苷2.00mg,以50%的乙醇超声振荡溶解并定容于5ml量瓶中,制得0.400mg/ ml的对照品溶液。 供试品溶液的制备 取样品约0.40g,精密称定,置圆底烧瓶中,加入50%乙醇50ml,称定重量,浸泡1.5h,回流0.5h,放冷,用50%乙醇补足减失的重量,摇匀,上清液用0.45μm微孔滤膜过滤,作为供试品溶液。 |
操作步骤: |
精密吸取对照液以及供试品溶液1OμL,分别注入液相色谱仪,按上述色谱条件测定,按外标法计算含量。 |
附件: |
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备注: |
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参考文献: |
朱华,黄权芳,周燕华等.HPLC-UV法测定广西不同产地何首乌中二苯乙烯苷的含量. 广西中医药.2006,29(6):52~54 |