方法名称: |
龙葵药材-甾体类生物总碱含量测定-HPLC-UV |
应用范围: |
用于龙葵药材甾体类生物总碱含量测定 |
方法原理: |
本品加乙醇回流提取,经液相色谱分离,在210 nm处测定峰面积,外标法计算含量 |
仪器设备及实验条件: |
仪器 液相- 质谱联用仪(SHIMADZU 2010A LC-MS),SPD-PDA检测器(日本岛津有限公司),澳洲茄胺标准品(北京丰斯特公司) 色谱条件 色谱柱:汉邦C18柱;流动相:乙腈/水(55:45,水相pH值用磷酸调节至2.7);流速:1.2ml/min;检测波长:210 nm |
试样制备: |
对照品溶液制备 无。 供试品溶液制备 1)龙葵甾体类生物总碱的提取:分离称取龙葵样品,采用V[c(HCl)=2 mol/L]:V(乙醇)=1:4溶液润湿24 h后,料液比按1 g:10 mL加入乙醇,在65 ℃的温度下醇提两次,每次4 h。过滤后合并滤液,滤液经减压蒸馏后得到黄绿色固体。用0.5 mol/L的HCl溶解后,用氯仿萃取三次,去氯仿层。水相用NaOH溶液调节至pH为10.5,用氯仿萃取三次,合并氯仿萃取液,蒸干后用甲醇溶解并定容至50 mL,得到龙葵甾体类生物总碱的甲醇溶液。2)苷元澳洲茄胺的提取:将含甾体类生物总碱的甲醇溶液定量取出并减压蒸干后,残留物用40 mL V[c(HCl)=2 mol/L]:V(乙醇)=1:1溶液溶解,在100 ℃的温度下水解,水解后将溶液中乙醇蒸馏去除,余液用氯仿萃取三次,取酸水层。经NaOH溶液调节至pH为10.5后,用氯仿萃取三次,合并氯仿萃取液,蒸干并用甲醇溶解,定容至50 mL,得到澳洲茄胺的甲醇溶液。 |
操作步骤: |
分别精密吸取澳洲茄胺对照液以及龙葵供试品溶液适量,注入液相色谱仪,按上述色谱条件测定峰面积。以外标法计算澳洲茄胺含量。 |
附件: |
点击下载 (解压密码:www.lindalemus.com) |
备注: |
|
参考文献: |
蒋新宇,杨辉,赵宇.龙葵中甾体类生物总碱的含量测定. 食品科学.2006,27(08):224~226 |