方法名称: |
两面针-氯化两面针-含量测定-HPLC-UV |
应用范围: |
用于测定两面针中氯化两面针碱含量 |
方法原理: |
本品加甲醇索氏提取,经液相色谱分离,在271 nm处测定峰面积,外标法计算含量 |
仪器设备及实验条件: |
仪器 日本岛津LC-10AT VP高效液相色谱仪、SPD-10AVP紫外检测器;威玛龙色谱数据处理工作站 色谱条件 色谱柱:Reliasil C18 (4.6 mm ×250 mm,5 μm);流动相:乙腈-水-三乙胺-磷酸(25∶75∶1∶1);检测波长:271 nm;柱温:室温 |
试样制备: |
对照品溶液制备 精密称取氯化两面针碱对照品24 mg,用少量甲醇溶解并转移至10 mL容量瓶中,加甲醇至刻度处,摇匀,制得浓度为2.4 mg/mL的氯化两面针碱对照品储液Ⅰ;再精密吸取0.5 mL对照品储液Ⅰ至25 mL容量瓶中,加入甲醇至刻度处,摇匀,制得浓度为48 μg/mL的氯化两面针碱对照品储液Ⅱ;再精密吸取1 mL对照品储液Ⅱ至5 mL容量瓶中,加流动相至刻度处,摇匀,配成每1 mL含9.6 μg氯化两面针碱的对照品溶液。 供试品溶液制备 精密称取样品粗粉约1 g,置于索氏提取器中,用5 mL盐酸(5→100)浸润30 min 后,加入100 mL甲醇,加热回流6 h,回收甲醇,蒸干,用甲醇溶解定容至25mL,摇匀,过滤,取续滤液1 mL置于25 mL容量瓶中,用流动相定容,摇匀,用0.45 μm的微孔滤膜滤过,弃去初滤液,取续滤液作为供试品溶液。 |
操作步骤: |
分别精密吸取氯化两面针碱对照液以及两面针供试品溶液各20 μL,注入液相色谱仪,按上述色谱条件测定峰面积。以外标法计算氯化两面针碱含量。 |
附件: |
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备注: |
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参考文献: |
覃兰芳,赖茂祥,梁威.RP-HPLC 法测定不同产地两面针中氯化两面针碱含量.广西科学. 2006,13(4):297~299 |