方法名称: |
辣椒及其制品—苏丹红色素—HPLC |
应用范围: |
本方法适用于辣椒及其制品中苏丹红色素含量的测定 |
方法原理: |
本品加乙腈振荡提取,经液相色谱分离,在500 nm处测定峰面积,外标法计算含量 |
仪器设备及实验条件: |
仪器 Waters 600S高效液相色谱仪(配有PDA检测器),Quattro Ultima TM Pt液质谱联用仪(配有Waters 2695 Separation Module,Waters 2996 PDA) 色谱条件 色谱柱:Agilent ODS-C18柱(150 mm×4.6 mm,5 μm);流动相:溶剂A:酸性水溶液(165mL 乙酸溶于1000 mL水中),溶剂B:乙腈,梯度洗脱:0~20 min,A=30~5 %,B=70~95 %;20~30 min,A=5~0 %,B=95~100 %;30~42 min,A=0 %,B=100 %;流速:0.7 mL/min;检测波长:500 nm;进样量:10 μL |
试样制备: |
对照品溶液制备 准确称取50.0 mg着色剂,并按不同方式移入100 mL容量瓶定容。 供试品溶液制备 先将采样放入一个容量较大的密闭容器中混合均匀,对于固体样品要用匀浆机或粉碎机磨细。之后准确称取样品2.000 g于50 mL聚四氟乙烯离心管中,用60 mL乙腈分3次加入样品中,每次振荡提取30 min,4000 rpm离心,合并上清液,过滤后,减压浓缩至干。再用10 mL二氯甲烷溶解,超声2 min后,减压浓缩至干,用3 mL乙腈分3次洗入刻度离心管中,过0.45 μm滤膜后,即得。 |
操作步骤: |
分别精密吸取苏丹红色素对照液以及辣椒供试品溶液适量,注入液相色谱仪,按上述色谱条件测定峰面积。以外标法计算苏丹红色素含量。 |
附件: |
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备注: |
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参考文献: |
李军,雍炜,李刚等.HPLC法测定辣椒及其制品中苏丹红色素含量.检验检疫科学. 2005.15(2): 43~45 |