方法名称: |
芦荟及芦荟饮料—低分子量有机酸—HPLC |
应用范围: |
本方法适用于芦荟及芦荟饮料中低分子量有机酸含量的测定 |
方法原理: |
本品加0.5 mol/L HCl在沸水浴中加热提取,经液相色谱分离,在220 nm处测定峰面积,外标法计算含量 |
仪器设备及实验条件: |
仪器 高效液相色谱仪(Waters 600泵,2487紫外检测器),超越2000色谱工作站 色谱条件 色谱柱:AtlantisTM C18分析柱(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动:10 mmol/LKH2PO4(pH为2.7)-CH3OH(体积比为95∶5);流速:0.8 mL/min;检测波长:220 nm;进样量:10 μL |
试样制备: |
对照品溶液制备 分别精确称取一定量分析纯的酒石酸、苹果酸、乳酸、乙酸、琥珀酸、富马酸、草酸和柠檬酸,用二次蒸馏水配制成浓度各为1 mg/mL的八种有机酸的标准储备液。用时适当稀释,0.45 μm滤膜过滤,即得。 供试品溶液制备 1)芦荟叶片:将芦荟叶片洗净、吸干表面水分后,称取鲜重0.5206 g,加2 mL 0.5 mol/LHCl和少量石英砂充分研磨成匀浆,匀浆液倒入试管中,在沸水浴中加热15~20 min,中间摇动几次,冷却后加入4 mL二次水静置过夜。次日匀浆液用小漏斗过滤至50 mL容量瓶中,再用二次水反复淋洗试管及残渣至近50 mL,最后定容至50 mL,过微孔滤膜(水系、孔径0.45 μm)即得。2)芦荟饮料:在干净的烧杯中移取少量市售芦荟饮料,用0.45 μm的滤膜过滤,移取10 mL至100 mL的容量瓶中,定容摇匀,即得。 |
操作步骤: |
分别精密吸取八种有机酸对照液以及芦荟及芦荟饮料供试品溶液各10 μL,注入液相色谱仪,按上述色谱条件测定峰面积。以外标法计算八种有机酸含量。 |
附件: |
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备注: |
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参考文献: |
何海霞,丁健桦,杨新磊. HPLC法测定芦荟及芦荟饮料中的低分子量有机酸.食品科技. 2006. ??231~234 |