方法名称: |
苦丁茶老叶—槲皮素和山柰素的含量测定—HPLC |
应用范围: |
本方法适用于苦丁茶老叶中槲皮素和山柰素含量的测定 |
方法原理: |
本品剪碎加70 %乙醇回流提取,经液相色谱分离,在360 nm处测定峰面积,外标法计算含量 |
仪器设备及实验条件: |
仪器 Waters液相色谱仪(美国Waters公司) 色谱条件 色谱柱:Waters公司N0va—PakC18柱(3.9 mm×300 mm,4 μm);流动相:甲醇—0.4 %磷酸溶液(50∶50) ;流速:0.7 mL/min;检测波长:360 nm;柱温:40 ℃ |
试样制备: |
对照品溶液制备 精密称取槲皮素对照品8.12 mg,山柰素对照品8.34 mg,分别置50 mL量瓶中,用甲醇溶解,并稀释至刻度再稀释2.5倍即得对照品溶液。 供试品溶液制备 称取苦丁茶老叶20 g,剪碎,加70 %乙醇200 mL,水浴回流1.5 h,过滤,残渣再加70 %乙醇100 mL,回流1 h;合并滤液,用70 %乙醇定容至250 mL量瓶中。取20 mL提取液置水浴上挥干,再用20 mL甲醇溶解残渣并转移到100 mL锥形瓶中,加入25 %盐酸溶液5 mL,置水浴上回流水解0.5 h后,取出,迅速冷却至室温,转移至50 mL量瓶中,用甲醇定容至刻度,摇匀,用0.45 μm微孔滤膜滤过,即得供试品溶液。 |
操作步骤: |
分别精密吸取槲皮素和山柰素对照液以及苦丁茶供试品溶液适量,注入液相色谱仪,按上述色谱条件测定峰面积。以外标法计算槲皮素和山柰素含量。 |
附件: |
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备注: |
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参考文献: |
蒙大平,黄雪梅,邓玉庄. 苦丁茶老叶中槲皮素和山柰素的含量测定. 中国医院药学杂志. 2006,26(2):135~137 |