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金银花及叶—黄酮类物质的含量测定—HPLC
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方法名称:
  银花及叶—黄酮类物质的含量测定—HPLC
应用范围:
  本方法适用于金银花及叶中黄酮类物质含量的测定
方法原理:
 本品粉碎后加甲醇超声提取,经液相色谱分离,在350 nm处测定峰面积,外标法计算含量
仪器设备及实验条件:
 

仪器   高效液相色谱仪Agilent 1100 (Agilent公司)

色谱条件  色谱柱:Zorbax 80A,Extend—C18(250 mm ×4. 6 mm,5 μm);流动相:甲醇∶0.02%磷酸(50∶50);流速:1. 0 mL/min;检测波长:350 nm ;柱温:30 ℃;进样量:10 μL

试样制备:
 

对照品溶液制备   准确称取槲皮素对照品0.0300 g,用甲醇溶解并定容于50 mL容量瓶,配制成0.60 mg/mL的溶液。取该溶液1.00 mL,用甲醇稀释并定容至10 mL,即得浓度为0.06 mg/mL的槲皮素对照品溶液,记为溶液A。以相同的方法制备浓度为0.057 mg/mL的木犀草素对照品溶液,记为溶液A。以相同的方法制备浓度为0.057 mg/mL的木犀草素对照品溶液,记为溶液B。取1 mL溶液A和1 mL溶液B,混合均匀成溶液C,即得。

供试品溶液制备   分别称取5 g经过干燥粉碎的金银花和金银花叶各一份,用100 mL甲醇在40 ℃超声提取30 min,过滤,减压浓缩,浓缩液用石油醚除杂,然后用甲醇定容至25 mL容量瓶,即得。

操作步骤:
  分别精密吸取槲皮素、木犀草素混合对照液以及金银花供试品溶液各10 μL,注入液相色谱仪,按上述色谱条件测定峰面积。以外标法计算黄酮类物质含量。
附件:
  点击下载 (解压密码:www.lindalemus.com)
备注:
 
参考文献:
  王丽婷,杨敏丽. 高效液相色谱法同时测定金银花及叶中的黄酮类物质. 时珍国医国药. 2007,18(8):1850~1851
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