方法名称： |
功劳去火片—盐酸小檗碱的含量测定—HPLC-UV |
应用范围： |
用于功劳去火片中盐酸小檗碱的含量测定 |
方法原理： |
本品细粉加甲醇超声提取，经液相色谱分离，在254nm处测定峰面积，外标法计算含量 |
仪器设备及实验条件： |
色谱仪器设备 液相色谱仪系统包括：PERKIN ELMERSeries 2000泵(美国)，Applied Biosystems785A检测器(美国)，HW千谱色谱工作站(南京)。 条件 色谱柱：Kromasil C18 ( 250mm×4. 6mm，5μm)；流动相 A：乙腈，B：乙腈-0.5 三乙胺水溶液(磷酸调pH3.1) ( 10∶90 )梯度洗脱，0→10 min：A（%)15→40、10→13 min：A（%)40→15；检测波长：254 nm；流速1 mL /min；柱温：室温；进样量：20μL。 |
试样制备： |
对照品溶液的制备 精密称取盐酸小檗碱对照品适量，置25 mL量瓶中，用甲醇制成26. 1μg/mL的盐酸小檗碱的对照品溶液。 供试品溶液的制备 精密称定样品细粉0.1g，置25 mL量瓶，加甲醇适量，超声30min，放冷定容，用0.45μm滤膜过滤，续滤液为供试品溶液。 |
操作步骤： |
在选定的色谱条件下，分别吸取对照品和供试品溶液各10μl进样，测定峰面积值，按外标法计算含量 |
附件： |
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备注： |
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参考文献： |
李艳荣，蒋晔，郝福等. RP-HPLC同时测定功劳去火片中栀子苷、黄芩苷及盐酸小檗碱的含量. 中成药. 2006，28(8)：1126～1129 |
