方法名称: |
车前草--乌索酸和齐墩果酸含量测定—HPLC法 |
应用范围: |
车前草药材的质量控制 |
方法原理: |
车前草经乙醇超声提取,经液相色谱仪分离,在210nm 处测定峰面积,标准曲线法计算乌索酸和齐墩果含量。 |
仪器设备及实验条件: |
色谱条件 色谱柱:Nova – Pak C18柱(3.9mm ×300mm,4μm,带保护柱);流动相:甲醇-水(88:12,V /V ) ,流速为0.8ml/min;柱温:25℃;检测波长:210nm。 仪器设备 美国Waters515双泵型高效液相色谱仪,2996光电二极管矩阵检测器,77251进样阀,20μl定量环,Enpower中文色谱管理系统 |
试样制备: |
对照品溶液的配制 精密称取干燥至恒重的乌索酸对照品22.8mg和齐墩果酸对照品7.8mg,置于10ml容量瓶中,加入适量甲醇溶解并定容,得对照品储备液。精密吸取1ml储备液置10ml容量瓶中,加甲醇稀释至刻度,混合均匀,制成乌索酸和齐墩果酸的浓度分别为0.228μg/μl和0.078μg/μl对照品混合溶液,备用。 样品溶液的制备 将烘干研细的车前草粉末精密称取约4g,置于具塞三角烧瓶中,加入10倍量95%乙醇,采用超声法提取60min,过滤,药渣洗涤两次,合并滤液于50ml容量瓶中,加乙醇定容至刻度,摇匀。滤液用0.2μm的滤膜过滤,,即得。 |
操作步骤: |
测定精密吸取车前草样品溶液10μl,注入液相色谱仪,按上述色谱条件测定,外标法计算样品中乌索酸和齐墩果酸的含量。 |
附件: |
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备注: |
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参考文献: |
邹盛勤.车前草中乌索酸 |