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重组美洲大蠊过敏原蛋白的表达方法
医药数据查询入口汇总 字体:
公开(公告)号 CN1888065A  
公开(公告)日 2007.01.03  
申请(专利)号 CN200610036646.0  
申请日期 2006.07.21  
专利名称 重组美洲大蠊过敏原蛋白的表达方法  
主分类号 C12N15/09(2006.01)I  
分类号 C12N15/09(2006.01)I;C12N15/12(2006.01)I;C12N15/63(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I;C07K1/14(2006.01)I;C12P21/02(2006.01)I  
分案原申请号  
优先权  
申请(专利权)人 汕头大学医学院  
发明(设计)人 何韶衡;张忠芳  
地址 515031广东省汕头市新陵路22号  
颁证日  
国际申请  
进入国家日期  
专利代理机构 广州粤高专利代理有限公司  
代理人 陈 卫  
国省代码 广东;44  
主权项 一种重组美洲大蠊过敏原蛋白Per a 1.0101、Per a 1.0102、Per a 1.0104或Per a 7.01的表达方法,其特征在于包括如下步骤: (1)从美洲大蠊组织中提取总RNA; (2)合成引物: pET-Per a 1.0101-P1 CATATGGAGTTCCAGAGCATTATCTCAAC pET-Per a 1.0101-P2 AAGCTTTCAGGGCAGGCCGAACAAG pET-Per a 1.0102-P1 CATATGAGCATTATCTCAACTCTAAATGCCATGCC pET-Per a 1.0102-P2 AAGCTTTCAGGGCAGGCCGAACAAGCTGC pET-Per a 1.0104-P1 CATATGGTTGGTGTCGATGGTCTCATAGAC pET-Per a 1.0104-P2 AAGCTTTCAGGGCAGGCCGAACCAG pET-Per a 7.01-P1 GAATTCGACGCGATCAAGAAGAAGATG pET-Per a 7.01-P2 GCGGCCGCGTTGCCAATAAGTTCGGTGAAAG (3)以总RNA为模板,通过RT-PCR获得美洲大蠊过敏原蛋白编码基因片段; (4)将编码基因克隆入原核表达载体中,转化宿主菌,培养所得重组工程菌,然后诱导其表达目的蛋白; (5)采用亲和层析方法对目的蛋白进行纯化,从而获得重组美洲大蠊过敏原蛋白Per a 1.0101、Per a 1.0102、Per a 1.0104或Per a 7.01。  
摘要 本发明涉及生物技术领域,公开了一种重组美洲大蠊过敏原蛋白的表达方法。本发明的目的是针对蟑螂过敏原浸提液进行免疫耐受治疗的不足,从常见的蟑螂种属美洲大蠊组织中提取总RNA,扩增出美洲大蠊主要过敏原基因Per a1.0101、Per a 1.0102、Per a 1.0104、Per a 7.01的编码基因,通过基因工程手段,在大肠杆菌中低温诱导表达重组蟑螂过敏原蛋白,可用于蟑螂引起的过敏反应疾病的诊断和治疗,避免了天然提取物的非单一性及标准化难的障碍。  
国际公布  
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