公开(公告)号
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CN1888065A
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公开(公告)日
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2007.01.03
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申请(专利)号
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CN200610036646.0
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申请日期
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2006.07.21
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专利名称
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重组美洲大蠊过敏原蛋白的表达方法
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主分类号
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C12N15/09(2006.01)I
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分类号
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C12N15/09(2006.01)I;C12N15/12(2006.01)I;C12N15/63(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I;C07K1/14(2006.01)I;C12P21/02(2006.01)I
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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汕头大学医学院
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发明(设计)人
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何韶衡;张忠芳
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地址
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515031广东省汕头市新陵路22号
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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广州粤高专利代理有限公司
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代理人
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陈 卫
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国省代码
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广东;44
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主权项
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一种重组美洲大蠊过敏原蛋白Per a 1.0101、Per a 1.0102、Per a 1.0104或Per a 7.01的表达方法,其特征在于包括如下步骤: (1)从美洲大蠊组织中提取总RNA; (2)合成引物: pET-Per a 1.0101-P1 CATATGGAGTTCCAGAGCATTATCTCAAC pET-Per a 1.0101-P2 AAGCTTTCAGGGCAGGCCGAACAAG pET-Per a 1.0102-P1 CATATGAGCATTATCTCAACTCTAAATGCCATGCC pET-Per a 1.0102-P2 AAGCTTTCAGGGCAGGCCGAACAAGCTGC pET-Per a 1.0104-P1 CATATGGTTGGTGTCGATGGTCTCATAGAC pET-Per a 1.0104-P2 AAGCTTTCAGGGCAGGCCGAACCAG pET-Per a 7.01-P1 GAATTCGACGCGATCAAGAAGAAGATG pET-Per a 7.01-P2 GCGGCCGCGTTGCCAATAAGTTCGGTGAAAG (3)以总RNA为模板,通过RT-PCR获得美洲大蠊过敏原蛋白编码基因片段; (4)将编码基因克隆入原核表达载体中,转化宿主菌,培养所得重组工程菌,然后诱导其表达目的蛋白; (5)采用亲和层析方法对目的蛋白进行纯化,从而获得重组美洲大蠊过敏原蛋白Per a 1.0101、Per a 1.0102、Per a 1.0104或Per a 7.01。
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摘要
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本发明涉及生物技术领域,公开了一种重组美洲大蠊过敏原蛋白的表达方法。本发明的目的是针对蟑螂过敏原浸提液进行免疫耐受治疗的不足,从常见的蟑螂种属美洲大蠊组织中提取总RNA,扩增出美洲大蠊主要过敏原基因Per a1.0101、Per a 1.0102、Per a 1.0104、Per a 7.01的编码基因,通过基因工程手段,在大肠杆菌中低温诱导表达重组蟑螂过敏原蛋白,可用于蟑螂引起的过敏反应疾病的诊断和治疗,避免了天然提取物的非单一性及标准化难的障碍。
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国际公布
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