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乙型肝炎病毒siRNA表达载体的构建以及抗病毒治疗应用
医药数据查询入口汇总 字体:
公开(公告)号 CN1523113A  
公开(公告)日 2004.08.25  
申请(专利)号 CN03117329.2  
申请日期 2003.02.20  
专利名称 乙型肝炎病毒siRNA表达载体的构建以及抗病毒治疗应用  
主分类号 C12N15/86  
分类号 C12N15/86;C12N15/11;C12N5/10;A61K48/00  
分案原申请号  
优先权  
申请(专利权)人 重庆医科大学  
发明(设计)人 黄爱龙;唐霓;张秉强;阎歌  
地址 400010重庆市渝中区医学院路1号  
颁证日  
国际申请  
进入国家日期  
专利代理机构  
代理人  
国省代码 重庆;85  
主权项 构建三种靶向乙型肝炎病毒(HBV)基因序列的siRNA表达载体,其特征在于:本发明在构建针对HBV基因的siRNA表达载体时,根据siRNA的设计原则,分别选择HBV包膜蛋白(MS)编码区69nt-87nt,聚合酶(P)编码区708nt-726nt,核心蛋白(C)编码区2052nt-2070nt的核苷酸序列,设计相应的siRNA序列,用BLAST软件进行同源分析证实为HBV高度保守序列后,化学合成单链寡核苷酸,体外经退火形成双链DNA,与真核表达载体pTZU6+1连接,酶切鉴定和序列测定分析表明成功构建了三种靶向乙型肝炎病毒(HBV)基因序列的siRNA表达载体。  
摘要 乙型肝炎病毒siRNA表达载体的构建以及抗病毒治疗应用,本发明属基因工程技术领域。本发明根据siRNA的设计原则,分别选择HBV包膜蛋白(MS)编码区69nt-87nt,聚合酶(P)编码区708nt-726nt,核心蛋白(C)编码区2052nt-2070nt的核苷酸序列,设计相应的siRNA序列,用BLAST软件进行同源分析证实为HBV高度保守序列后,化学合成单链寡核苷酸,体外经退火形成双链DNA,与真核表达载体pTZU6+1连接,酶切鉴定和序列测定分析表明成功构建了三种靶向乙型肝炎病毒(HBV)基因序列的siRNA表达载体。上述表达载体通过阳离子脂质体介导与HBV真核表达载体pHBV共转染肝癌细胞HepG2后,采用免疫荧光和Abbott实验均证实HBV siRNA具有较强抑制病毒复制和表达的作用。  
国际公布  
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