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重组人VIP-Humanin融合蛋白制备方法
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公开(公告)号 CN101144080A  
公开(公告)日 2008.03.19  
申请(专利)号 CN200710129894.4  
申请日期 2007.08.01  
专利名称 重组人VIP-Humanin融合蛋白制备方法  
主分类号 C12N15/09(2006.01)I  
分类号 C12N15/09(2006.01)I;C07K19/00(2006.01)I;C12N15/62(2006.01)I;C12P21/02(2006.01)I  
分案原申请号  
优先权  
申请(专利权)人 北京化工大学  
发明(设计)人 陈劲春;常 婧  
地址 100029北京市朝阳区北三环东路15号  
颁证日  
国际申请  
进入国家日期  
专利代理机构  
代理人  
国省代码 北京;11  
主权项 一种重组人VIP-HN融合蛋白的制备方法,其特征在于,采用基因工程菌发酵法生产,而不是从天然存在的生物材料中制备。  
摘要 发明专利名称:重组人VIP-Humanin融合蛋白制备方法 技术领域:本发明涉及生物工程、食品工程、保健品领域。本发明采用DNA重组技术,根据大肠杆菌偏爰密码,设计、合成了串联共表达人VIP-Humanin融合蛋白的编码基因并由BamHI和SaCI定向克隆进pET28a(+);筛出阳性克隆之后,挑取一个单菌落对其发酵条件和产物分离纯化工艺进行优化处理。发酵3h左右OD600达到0.6~0.7时,加入诱导剂至终浓度1mmol/mL,诱导表达4h目标蛋白合成达到高峰,粗蛋白采用Ni-螯合亲和层析进行初分,DEAE-sepherose离子交换柱纯化,经重组肠激酶酶切纯化后获得rhVIP-Humanin融合蛋白。采用Tricine-SDS-PAGE,RP-HPLC和MALDI-TOF-TOF-MS等表征确认所制备的蛋白是rhVIP-Humanin。它将用于防治老年痴呆症。  
国际公布  
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