丁酸氢化可的松乳膏－丁酸氢化可的松－高效液相色谱法

本方法采用高效液相色谱法测定丁酸氢化可的松乳膏中丁酸氢化可的松的含量。

本方法适用于丁酸氢化可的松乳膏。

供试品加甲醇置50℃水浴中加热，搅拌使丁酸氢化可的松溶解，放冷，加入内标再经甲醇定量稀释后摇匀，置冰浴中冷却2小时以上，取出，迅速滤过，放至室温进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长240nm处检测丁酸氢化可的松的峰面积，计算出其含量。

1. 乙腈

2. 冰醋酸

3. 甲醇

4. 甲睾酮

1. 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按丁酸氢化可的松峰计算应不低于1500。

1.3 紫外吸收检测器

2. 色谱条件

2.1 流动相：水 乙腈 冰醋酸=55 45 0.5

2.2 检测波长：240nm

2.3 柱温：室温

1. 称取供试品

精密称取本品适量（约相当于丁酸氢化可的松1.3mg)为供试品。

2. 内标溶液的制备

精密称取甲睾酮适量，加甲醇制成每1mL中含0.18mg的溶液，即为内标溶液。

3. 对照品溶液的制备

精密称取丁酸氢化可的松对照品适量，加甲醇溶解并定量稀释成每1mL中约含0.26mg的溶液，精密量取该溶液与内标溶液各5mL，置50mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即为对照品溶液。

4. 供试品溶液的制备

供试品加甲醇15mL，置50℃水浴中加热，搅拌使丁酸氢化可的松溶解，放冷，精密加内标溶液5mL，用甲醇精密稀释至50mL，摇匀，置冰浴中冷却2小时以上，取出，迅速滤过，放至室温，即为供试品溶液。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20mL，注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器于波长240nm处测定丁酸氢化可的松（C₂₅H₃₆O₆)的峰面积，计算出其含量。

中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005版，一部，p.22。