石杉碱甲原料药－石杉碱甲－高效液相色谱法

本方法采用高效液相色谱法测定石杉碱甲原料药中石杉碱甲的含量。

本方法适用于石杉碱甲原料药。

供试品经盐酸溶液溶解并定量稀释，进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长310nm处检测石杉碱甲的峰面积，计算出其含量。

1. 乙腈

2. 磷酸盐缓冲液

3. 盐酸溶液（0.01mol/L)

1. 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按石杉碱甲峰计算应不低于2000。

1.3 紫外吸收检测器

2. 色谱条件

2.1 流动相：乙腈 磷酸盐缓冲液=14 86

2.2 检测波长：310nm

2.3 柱温：室温

1. 磷酸盐缓冲液

取磷酸二氢钾2.72g，加水1000mL溶解，用磷酸调节pH值至2.5。

2. 盐酸溶液（0.01mol/L)

取盐酸0.9mL，加水适量使成1000mL，摇匀。

3. 对照品溶液的制备

精密称取石杉碱甲对照品适量，用0.01mol/L盐酸溶液溶解并定量稀释成每1mL中约含40µg的溶液，即为对照品溶液。

4. 供试品溶液的制备

精密称取供试品适量，用0.01mol/L盐酸溶液溶解并定量稀释成每1mL中约含石杉碱甲40µg的溶液，即为供试品溶液。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20mL，注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器于波长310nm处测定石杉碱甲（C₁₅H₁₈N₂O)的峰面积，计算出其含量。

中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005版，二部，p.86。