戊酸雌二醇注射液－戊酸雌二醇－高效液相色谱法

本方法采用高效液相色谱法测定戊酸雌二醇注射液中戊酸雌二醇的含量。

本方法适用于戊酸雌二醇注射液。

供试品经乙醚转移洗涤，置温水浴内使乙醚挥散，用甲醇振摇提取，加入内标后再经甲醇定量稀释，进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长281nm处检测戊酸雌二醇的峰面积，计算出其含量。

1. 甲醇

2. 醋酸甲地孕酮

1. 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按戊酸雌二醇峰计算应不低于3000。

1.3 紫外吸收检测器

2. 色谱条件

2.1 流动相：甲醇 水=85 15

2.2 检测波长：281nm

2.3 柱温：室温

1. 内标溶液的制备

精密称取醋酸甲地孕酮适量，加甲醇制成每1mL中含0.4mg的溶液，即为内标溶液。

2. 对照品溶液的制备

精密称取戊酸雌二醇对照品适量，加甲醇制成每1mL中约含2mg的溶液，精密量取该溶液与内标溶液各5mL，置25mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即为对照品溶液。

3. 供试品溶液的制备

用内容量移液管精密量取供试品适量（约相当于戊酸雌二醇10mg)，置具塞离心管中，用少量乙醚分数次洗涤移液管内壁，洗液并入离心管中，置温水浴内使乙醚挥散，用甲醇振摇提取4次（第1~3次各5mL，第四次3mL)，每次振摇10分钟后离心15分钟，并用滴管将甲醇液移置25mL量瓶中，合并提取液，精密加内标溶液5mL，用甲醇稀释至刻度，摇匀，即为供试品溶液。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005版，一部，p.99。