卡铂原料药－卡铂－高效液相色谱法

本方法采用高效液相色谱法测定卡铂原料药中卡铂的含量。

本方法适用于卡铂原料药。

供试品经水溶解并定量稀释，加入内标后再经水定量稀释，进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长229nm处检测卡铂的峰面积，计算出其含量。

水

1. 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按卡铂峰计算应不低于3000。

1.3 紫外吸收检测器

2. 色谱条件

2.1 流动相：水

2.2 检测波长：229nm

2.3 流速：2mL/min

2.4 柱温：室温

1. 内标溶液的制备

精密称取尿苷约25mg，置25mL量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，即为内标溶液。

2. 对照品溶液的制备

精密称取卡铂对照品约25mg，置25mL量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取该溶液与内标溶液各5mL，置另一25mL量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，即为对照品溶液。

3.供试品溶液的制备

精密称取供试品约25mg，置25mL量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取该溶液与内标溶液各5mL，置另一25mL量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，即为供试品溶液。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10mL，注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器于波长229nm处测定卡铂（C₆H₁₂N₂O₄Pt)的峰面积，计算出其含量。