甲状腺片—碘的测定—分光光度法

本方法采用分光光度法测定甲状腺片中碘的含量。

本方法适用于甲状腺片。

供试品照氧瓶燃烧法进行有机破坏，以氢氧化钠溶液为吸收液，俟生成的烟雾完全吸收后，取上清液加1mol/L硫酸溶液调节pH值约为2，用磷酸盐缓冲液（pH2.0)定量稀释，

滴加溴试液至溶液呈稳定的淡黄色，加热至沸时取下，立即加入20%甲酸钠溶液1~2滴，使残留的溴色完全褪去，再加热至沸时取下，放冷至室温，加水、1%碘化钾溶液与淀粉溶液，定量稀释，摇匀，置冰浴中15分钟后，迅速调至室温，再放置5分钟，，置紫外可见分光光度计，于585nm波长处测定吸收度，计算出其含量。

1. 醋酸-溴溶液

2. 0.4%氢氧化钠溶液

3. 甲酸

4. 碘化钾

5. 1%碘化钾溶液

6. 淀粉溶液

7.硫酸溶液(1mol/L)

8. 磷酸盐缓冲液（pH2.0)

9. 溴试液

10. 20%甲酸钠溶液

1.1 稀硫酸

紫外可见分光光度计

1. 醋酸-溴溶液

取醋酸钾10g，加少量冰醋酸溶解后，加溴0.40mL，以冰醋酸稀释至100mL。

2. 淀粉溶液

取可溶性淀粉0.3g与水扬酸0.1g，加水5mL，搅成糊状，溶于60mL沸水中，煮沸1分钟，放冷即得，可用3~4日。

3.硫酸溶液(1mol/L)

取硫酸30mL，缓缓注入适量水中，冷却至室温，加水稀释至1000mL，摇匀。

4. 磷酸盐缓冲液（pH2.0)

甲液：取磷酸16.6mL，加水至1000mL，摇匀；乙液：取磷酸氢二钠71.63g，加水使溶解成1000mL。取上述甲液72.5mL与乙液27.5mL混合，摇匀，即得。

5. 溴试液

取溴2~3mL，置用凡士林涂塞的玻璃瓶中，加水100mL，振摇使成饱和的溶液，即得。本液应置暗处保存。

6. 稀硫酸

取硫酸57mL，加水稀释至1000mL。

7.对照品溶液的制备

精密称取碘化钾对照品0.2224g，置100mL量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取2mL，置200mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，精密量取5mL，置100mL量瓶中，加磷酸盐缓冲液（pH2.0)稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液（每1mL中含碘0.85µg)。

8. 供试品溶液的制备

取供试品20片，除去包衣后，精密称定，研细，精密称取适量（相当于甲状腺粉35mg)，照氧瓶燃烧法进行有机破坏，选用1000mL燃烧瓶，精密加入0.4%氢氧化钠溶液50mL为吸收液，俟生成的烟雾完全吸收后，摇匀，精密量取上清液10mL，加1mol/L硫酸溶液调节pH值约为2，用磷酸盐缓冲液（pH2.0)定量稀释成每1mL中含碘0.85µg的溶液，即得供试品溶液。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

精密量取供试品溶液10mL，置25mL烧杯中，滴加溴试液至溶液呈稳定的淡黄色，加热至沸时取下，立即加入20%甲酸钠溶液1~2滴，使残留的溴色完全褪去，再加热至沸时取下，放冷至室温，加水3mL、1%碘化钾溶液1.0mL与淀粉溶液1.0mL，定量转移25mL量瓶中，加水至刻度，摇匀，置冰浴中15分钟后，迅速调至室温，再放置5分钟，另精密量取对照品溶液10mL，置25mL烧杯中，加稀硫酸1滴后，自“滴加溴试液至溶液呈稳定的淡黄色”起同法操作，取对照品溶液与供试品溶液照紫外分光光度法，于波长585nm处测定吸收度。

注：分光光度法应以配制供试品的同批溶剂为对照，采用1cm的石英吸收池。以吸收度最大的波长作为测定波长，一般供试品的吸收度读数，以在0.3-0.7之间的误差较小。仪器的狭缝波带宽度应小于供试品吸收带的半宽度，否则测得的吸收度偏低。狭缝宽度的选择，应以减少狭缝宽度时供试品的吸收度不再增加为准。由于吸收池和溶剂本身可能有空白吸收，因此测定供试品的吸收度后应减去空白读数，再计算含量。

中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005年版，二部，p.113。