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注射用甲氨蝶呤-甲氨蝶呤-高效液相色谱法

医药数据库中心 药学论坛 注射用甲氨蝶呤-甲氨蝶呤-高效液相色谱法
方法名称:
注射用甲氨蝶呤甲氨蝶呤-高效液相色谱法
应用范围:

本方法采用高效液相色谱法测定注射用甲氨蝶呤中甲氨蝶呤的含量。

本方法适用于注射用甲氨蝶呤。

方法原理:

供试品经流动相溶解并定量稀释,进入高效液相色谱仪进行色谱分离,用紫外吸收检测器,于波长302nm处检测甲氨蝶呤的峰面积,计算出其含量。

试剂:

1. 乙腈

2. 7.0%枸橼酸溶液

3. 2.0%无水磷酸氢二钠溶液

仪器设备:

1. 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,理论塔板数按甲氨蝶呤峰计算应不低于1000。

1.3 紫外吸收检测器

2. 色谱条件

2.1 流动相:乙腈 7.0%枸橼酸溶液 2.0%无水磷酸氢二钠溶液=10 10 80

2.2 检测波长:302nm

2.3 柱温:室温

试样制备:

1. 对照品溶液的制备

精密称取甲氨蝶呤对照品适量,加流动相溶解并定量稀释成每1mL中约含0.1mg的溶液,即为对照品溶液。

2. 供试品溶液的制备

取供试品装量差异项下内容物适量,精密称定,加流动相溶解并定量稀释成每1mL中约含甲氨蝶呤0.1mg的溶液(100mg规格),或取供试品5瓶,用流动相将内容物溶解并转移至250mL量瓶中,并稀释至刻度,摇匀(5mg规格),即为供试品溶液。

注:“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

操作步骤:
分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10mL,注入高效液相色谱仪,用紫外吸收检测器于波长302nm处测定甲氨蝶呤(C20H22N8O5)的峰面积,计算出其含量。
参考文献:

中华人民共和国药典,国家药典委员会编,化学工业出版社,2005版,一部,p.121。

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