尼尔雌醇原料药－尼尔雌醇－高效液相色谱法

本方法采用高效液相色谱法测定尼尔雌醇原料药中尼尔雌醇的含量。

本方法适用于尼尔雌醇原料药。

供试品经甲醇溶解并稀释，再取适量加流动相稀释，进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长221nm处检测尼尔雌醇的峰面积，计算出其含量。

甲醇

1. 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按尼尔雌醇峰计算应不低于2500。

1.3 紫外吸收检测器

2. 色谱条件

2.1 流动相：甲醇 水=80 20

2.2 检测波长：221nm

2.3 柱温：室温

1.对照品溶液的制备

精密称取尼尔雌醇对照品适量，加流动相溶解并定量稀释制成每1mL中约含0.1mg溶液，即为对照品溶液。

2. 供试品溶液的制备

精密称取供试品适量，加流动相溶解并定量稀释制成每1mL中约含0.1mg溶液，即为供试品溶液。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20mL，注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器于波长221nm处测定尼尔雌醇（C₂₅H₃₂O₃)的峰面积，计算出其含量。