异福片－利福平与异烟肼－高效液相色谱法

本方法采用高效液相色谱法测定异福片中利福平与异烟肼的含量。

本方法适用于异福片。

供试品加流动相溶解并稀释，进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长254nm处检测利福平与异烟肼的峰面积，计算出其含量。

1. 庚烷磺酸钠溶液（0.01mol/L)

2. 乙腈

3. 稀磷酸

1. 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

氰基键合硅胶为填充剂

1.3 紫外吸收检测器

2. 色谱条件

2.1 流动相：0.01mol/L庚烷磺酸钠溶液（稀磷酸调节pH值至.2) 乙腈=44 56

2.2 检测波长：254nm

2.3 柱温：室温

1. 对照品溶液的制备

精密称取利福平和异烟肼对照品适量，用流动相溶解并定量稀释制成与供试液浓度相同的溶液，即为对照品溶液。

2. 供试品溶液的制备

取供试品10片，除去薄膜衣，精密称定，研细，精密称取细粉适量（约相当于利福平60mg)，置100mL量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5mL，置50mL量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，即为供试品溶液。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20mL，注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器于波长254nm处测定利福平（C₄₃H₅₈N₄O₁₂)、异烟肼（C₆H₇N₃O)的峰面积，计算出其含量。

中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005版，二部，p.219。