克拉霉素原料药－克拉霉素－高效液相色谱法

本方法采用高效液相色谱法测定克拉霉素原料药中克拉霉素的含量。

本方法适用于克拉霉素原料药。

供试品加流动相溶解并稀释，进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长210nm处检测克拉霉素的峰面积，计算出其含量。

1. 乙腈

2. 磷酸盐缓冲液

3. 磷酸

4. 三乙胺

1. 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论板数按克拉霉素峰计算不低于3000。

1.3 紫外吸收检测器

2. 色谱条件

2.1 流动相：磷酸盐缓冲液 乙腈=600 400

2.2 检测波长：210nm

2.3 柱温：45℃

2.4 流速：1.0mL/min

1. 磷酸盐缓冲液

称取磷酸二氢钾9.11g，加水溶解并稀释至1000mL，加三乙胺2mL，用磷酸调节pH值至5.5。

2. 对照品溶液的制备

精密称取克拉霉素对照品适量，加流动相溶解并定量稀释制成3. 供试品溶液的制备

精密称取供试品适量，加流动相溶解并定量稀释制成每1mL中约含0.35mg的溶液，即为供试品溶液。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20mL，注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器于波长210nm处测定克拉霉素（C₃₈H₆₉NO₁₃)的峰面积，计算出其含量。

中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005版，二部，p.232。