利血平片—利血平的测定—荧光分析法

本方法采用荧光分析法测定利血平片中利血平的含量。

本方法适用于利血平片。

供试品加三氯甲烷溶解，乙醇稀释制成供试液，经前处理照荧光分析法，在激发光波长400nm、发射光波长500nm处测定荧光强度，计算出其含量。

1. 三氯甲烷

2. 乙醇

3. 五氧化二钒试液

荧光光度计

1. 五氧化二钒试液

取五氧化二钒适量，加磷酸激烈振摇2小时后得其饱和溶液，用垂熔玻璃漏斗滤过，取滤液1份加水3份，混匀，即得。

2.对照品溶液的制备

精密称取利血平对照品10mg，置100mL棕色量瓶中，加三氯甲烷10mL溶解后，再用乙醇稀释至刻度，摇匀，精密量取2mL，置100mL棕色量瓶中，用乙醇稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液。

3. 供试品溶液的制备

取供试品20片，如为糖衣片应除去包衣，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于利血平0.5mg)，置100mL棕色量瓶中，加热水10mL，摇匀后，加三氯甲烷10mL，振摇，用乙醇定量稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液，用乙醇定量稀释成每1mL中约含利血平2µg的溶液，即得供试品溶液。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

精密量取对照品溶液与供试品溶液各5mL，分别置具塞试管中，加五氧化二钒试液2.0mL，激烈振摇后，在30℃放置1小时，照荧光分析法，在激发光波长400nm、发射光波长500nm处测定荧光强度，计算，即得。

注：荧光分析法应以配制供试品的同批溶剂为对照，采用1cm的石英吸收池。以吸收度最大的波长作为测定波长，一般供试品的吸收度读数，以在0.3-0.7之间的误差较小。仪器的狭缝波带宽度应小于供试品吸收带的半宽度，否则测得的吸收度偏低。狭缝宽度的选择，应以减少狭缝宽度时供试品的吸收度不再增加为准。由于吸收池和溶剂本身可能有空白吸收，因此测定供试品的吸收度后应减去空白读数，再计算含量。

中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005年版，一部，p.264。