阿桔片－吗啡－高效液相色谱法

本方法采用高效液相色谱法测定阿桔片中吗啡的含量。

供试品加5%醋酸溶液适量，超声使吗啡溶解，滤过，取续滤液置固相萃取柱上，滴加氨试液适量使柱内溶液的pH值约为9，摇匀，待溶剂滴尽后，用水20mL冲洗，用含20%甲醇的5%醋酸溶液洗脱，用5mL量瓶收集洗脱液至刻度，进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长220nm处检测吗啡的峰面积，计算出其含量。

1. 乙腈

2. 磷酸二氢钾溶液(0.05mol/L)

3. 庚烷磺酸钠水溶液(0.0025mol/L)

4. 甲醇

5. 20%甲醇

6. 5%醋酸溶液

7. 氨水溶液(pH值约为9)

1. 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按吗啡峰计算应不低于1000。

1.3 紫外吸收检测器

2. 色谱条件

2.1 流动相：0.05mol/L磷酸二氢钾溶液 0.0025mol/L庚烷磺酸钠水溶液 乙腈=2 2 1

2.2 检测波长：220nm

2.3 柱温：室温

取水适量，滴加氨试液至pH9。

2. 对照品溶液的制备

精密称取吗啡对照品适量，用含20%甲醇的5%醋酸溶液溶解并定量稀释制成每1mL中约含吗啡0.06mg的溶液，即为对照品溶液。

3. 供试品溶液的制备

取固相萃取柱一支，依次用甲醇-水(3:1)15mL与水5mL冲洗，再用pH值约为9的氨水溶液冲洗至流出液pH值约为9，待用。取供试品20片，精密称定，研细，精密称取约1片量，置磨口锥形瓶中，精密加5%醋酸溶液10mL，超声处理20分钟使吗啡溶解，取出，放至室温，滤过，精密量取续滤液1mL，置上述固相萃取柱上，滴加氨试液适量使柱内溶液的pH值约为9，摇匀，待溶剂滴尽后，用水20mL冲洗，用含20%甲醇的5%醋酸溶液洗脱，用5mL量瓶收集洗脱液至刻度，摇匀，即为供试品溶液。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005版，二部，p.282。