青霉素钾原料药－青霉素钾－高效液相色谱法

本方法采用高效液相色谱法测定青霉素钾原料药中青霉素钾的含量。

本方法适用于青霉素钾原料药。

供试品经水溶解并定量稀释，进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长225nm处检测青霉素钾的峰面积，计算出其含量。

1. 乙腈

2. 磷酸

3. 0.1mol/L磷酸二氢钾溶液

1. 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按青霉素钠峰计算应不低于1600。

1.3 紫外吸收检测器

2. 色谱条件

2.1 流动相：0.1mol/L磷酸二氢钾溶液(用磷酸调节pH值至2.5) 乙腈=70 30

2.2 检测波长：225nm

2.3 柱温：室温

2.4 流速：1mL/min

1. 对照品溶液的制备

精密称取青霉素对照品适量，加水溶解并定量稀释制成每1mL中约含0.5mg的溶液，摇匀，即为对照品溶液。

2. 供试品溶液的制备

精密称取供试品适量，加水溶解并定量稀释制成每1mL中约含0.5mg的溶液，摇匀，即为供试品溶液。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10mL，注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器于波长225nm处测定，其结果乘以1.1136，即为供试品中C₁₆H₁₇KN₂O₄S的含量。每1mg的C₁₆H₁₇KN₂O₄S相当于1598青霉素单位。

中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005版，二部，p.313。