依托泊苷注射液—依托泊苷—高效液相色谱法

本方法采用高效液相色谱法测定依托泊苷注射液中依托泊苷的含量。

本方法适用于依托泊苷注射液中依托泊苷的测定。

精密量取本品5mL，置 100mL量瓶中，用流动相（乙腈 醋酸盐缓冲液=30 70)稀释至刻度，摇匀，精密量取10mL，置50mL量瓶中用流动相（乙腈 醋酸盐缓冲液=30 70)稀释至刻度，摇匀，精密吸取20μL注入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长254nm处检测依托泊苷的吸收值，计算出其含量。

1. 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

苯基硅烷键合硅胶为填充剂，理论板数按依托泊苷峰计算应不低于 3000。

1.3 紫外吸收检测器

2. 色谱条件

2.1 流动相：乙腈＋醋酸盐缓冲液（pH4.0)= 30 70

2.2 检测波长：254nm

2.3 柱温：室温

1. 对照品溶液的制备

精密称取依托泊苷对照品适量，加甲醇制成每1mL含依托泊苷 0.2mg的溶液。

2. 供试品溶液的制备

精密量取本品5mL，置 100mL量瓶中，用流动相（乙腈 醋酸盐缓冲液=30 70)稀释至刻度，摇匀，精密量取10mL，置50mL量瓶中用流动相（乙腈 醋酸盐缓冲液=30 70)稀释至刻度，摇匀。

分别精密吸取上述对照品溶液与供试品溶液各20μL 注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长254nm处测定依托泊苷吸收值，计算出其含量。

中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005年版，二部，p345。