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炔雌醇的测定—高效液相色谱法

医药数据库中心 药学论坛 炔雌醇的测定—高效液相色谱法
方法名称:
炔雌醇的测定—高效液相色谱法
应用范围:

本方法采用高效液相色谱法测定炔雌醇的含量。

本方法适用炔雌醇。

方法原理:

供试品制成无水乙醇溶液,加入内标溶液,进入高效液相色谱仪进行色谱分离,用紫外吸收检测器,于波长281nm处检测炔雌醇(C20H24O2)和内标醋酸甲地孕酮的吸收值,计算出其含量。

试剂:

1.甲醇

2.水

3.无水乙醇

仪器设备:

1. 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,理论板数按炔雌醇峰计算应不低于 1000。

1.3 紫外吸收检测器

2. 色谱条件

2.1 流动相:甲醇+水= 70+30

2.2 检测波长:281nm

2.3 柱温:室温

试样制备:

1. 称取供试品

称取本品40mg,精密称定。

2. 对照品溶液的制备

精密称取炔雌醇对照品适量,以无水乙醇溶解,即得对照品溶液。

3. 内标溶液的制备

醋酸甲地孕酮20mg,精密称定,置10mL量瓶中,以无水乙醇溶解并稀释至刻度,摇匀,即得。

4. 供试品溶液的制备

将供试品置于5mL量瓶中,以无水乙醇溶解并稀释至刻度,摇匀,即得供试品溶液。

注:“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

操作步骤:

分别精密吸取上述供试品溶液与内标溶液2mL,置10mL量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,取10μL 注入高效液相色谱仪,记录色谱图,用紫外吸收检测器,于波长240nm处测定炔雌醇和内标的吸收值,按内标法以峰面积计算,即得。另取炔雌醇对照品溶液,同法测定。

参考文献:

中华人民共和国药典,国家药典委员会编,化学工业出版社,2005年版,二部,p359。

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