毒花毛苷K注射液—毒花毛苷K的测定—洋地黄生物测定法

本方法采用洋地黄生物测定法测定毒花毛苷K注射液中毒花毛苷K的效价。

本法系比较洋地黄标准品（S)与供试品（T)对鸽的最小致死量（u/kg)，以测定供试品的效价。

1. 水

2. 氯化纳注射液

1. 供试品溶液的制备

精密称取本品适量，加水制成每1mL中约含0.50mg的溶液，作为供试品溶液。临用时，精密量取上述供试品溶液适量，加氯化纳注射液稀释。稀释倍数应调节适当（通常为40-60倍)使鸽的平均最小致死量在25-34mL之间。

2. 对照品溶液的制备

精密称取毒花毛苷G对照品适量，按标示的无水物含量计算，每1mL加水4mL溶解，作为对照品溶液。临用时，按上述方法制成稀释液。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

取健康合格的鸽，试验前16-24小时移去饲料，但仍给予饮水，临试验前准确称重，选取体重在250-400g的鸽，分成两组，一组为标准品组，一组为供试品组。将鸽仰缚于适宜的固定版上，在一侧翼静脉处拔除羽毛少许，露出翼静脉，插入与最小刻度不大于0.02mL的滴定管相连的注射针头，缓缓注入标准品稀释液或供试品稀释液，开始时一次注入0.5mL，然后以每分钟0.2mL等速连续注入，至鸽中毒死亡即停止注入。记录注入稀释液的总量（mL)，换算成每1kg体重的致死量（mL)中所含效价（u/kg)，取其中10倍量的对数值作为反应值，照生物鉴定统计法中直接测定法计算效价及实验误差。本法的可信限率FL（%)不得大于15%。

中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005年版，二部，p.373。