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注射用细胞色素C—细胞色素C的测定—分光光度法

医药数据库中心 药学论坛 注射用细胞色素C—细胞色素C的测定—分光光度法
方法名称:
注射用细胞色素C—细胞色素C的测定—分光光度法
应用范围:

本方法采用分光光度法测定注射用细胞色素C中细胞色素C的含量。

本方法适用于注射用细胞色素C
方法原理:

取本品适量,加磷酸盐缓冲液溶解并定容,再加连二亚硫酸钠,照紫外-可见分光光度法,在550nm波长处,以间隔0.5nm找出最大吸收波长,测定吸光度,按细胞色素C的吸收系数(E1m)为23.0计算,即得。

试剂:

1. 连二亚硫酸钠

2. 磷酸盐缓冲液

仪器设备:
可见分光光度计
试样制备:

1.磷酸盐缓冲液

磷酸二氢钠1.38g与磷酸氢二钠31.2g,加水适量使溶解成1000mL,调节pH值至7.3。

2.供试品溶液的制备

取本品3支,各加磷酸盐缓冲液适量使溶解,分别移至100mL量瓶中,加磷酸盐缓冲液稀释至刻度,即得供试品溶液。

注:“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

操作步骤:

供试品的测定

于上述供试品溶液分别加连二亚硫酸钠15mg,照紫外-可见分光光度法,在550nm波长处,以间隔0.5nm找出最大吸收波长,依法测定吸光度,按细胞色素C的吸收系数(E1m)为23.0计算,即得。每支含量应符合规定;若有一支不符合规定,另取3支复试,均应符合规定。

参考文献:
中华人民共和国药典,国家药典委员会编,化学工业出版社,2005年版,二部,p.371。
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