细胞色素C溶液—细胞色素C的测定—分光光度法

本方法采用分光光度法测定细胞色素C溶液中细胞色素C的含量。

本方法适用于细胞色素C溶液。

取本品适量，加磷酸盐缓冲液溶解并定容，再加连二亚硫酸钠，照紫外-可见分光光度法，在550nm波长处，以间隔0.5nm找出最大吸收波长，测定吸光度，按细胞色素C的吸收系数（E1m)为23.0计算，即得。

1. 连二亚硫酸钠

2. 磷酸盐缓冲液

1. 磷酸盐缓冲液

取磷酸二氢钠1.38g与磷酸氢二钠31.2g，加水适量使溶解成1000mL，调节pH值至7.3。

2.供试品溶液的制备

精密量取本品适量（相当于细胞色素C100mg)，置10mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

供试品的测定

精密量取上述供试品溶液1mL置50mL的量瓶中，加磷酸盐缓冲液溶解并定容，再加连二亚硫酸钠15mg，照紫外-可见分光光度法，在550nm波长处，以间隔0.5nm找出最大吸收波长，依法测定吸光度，按细胞色素C的吸收系数（E1m)为23.0计算，即得。

中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005年版，二部，p.370。