复方己酸羟孕酮注射液—己酸羟孕酮和戊酸雌二醇的测定—高效液相色谱法

本方法采用高效液相色谱法测定复方己酸羟孕酮注射液中己酸羟孕酮（C₂₇H₄₉O₄)和戊酸雌二醇的含量。

本方法适用于复方己酸羟孕酮注射液。

供试品加甲醇使溶解溶解，进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长225nm处检测己酸羟孕酮和戊酸雌二醇吸收值，计算出其含量。

1. 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，己酸羟孕酮峰和戊酸雌二醇峰的分离度应符合要求。

1.3 紫外吸收检测器

2. 色谱条件

2.1 流动相：甲醇 水=85 15

2.2 检测波长：225nm

2.3 柱温：室温

2.4 流速：0.7mL/min

1. 称取供试品

精密量取本品1mL。

2. 对照品溶液的制备

精密称取己酸羟孕酮和戊酸雌二醇对照品适量，加流动相分别制成每1mL含0.02 mg的溶液。

3. 供试品溶液的制备

将供试品置25mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度摇匀，精密量取1mL置10mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，作为戊酸雌二醇供试品溶液；精密量取此液1mL至50mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，作为己酸羟孕酮供试品溶液。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

分别精密吸取上述对照品溶液与供试品溶液各10μL 注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长225nm处测定己酸羟孕酮和戊酸雌二醇的吸收值，计算出其含量。

中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005年版，二部，p.419。