复方左炔诺孕酮滴丸—左炔诺孕酮和炔雌醇的测定—高效液相色谱法

本方法采用高效液相色谱法测定复方左炔诺孕酮滴丸中左炔诺孕酮和炔雌醇的含量。

本方法适用复方左炔诺孕酮滴丸。

将供试品内精密加入内标溶液，经水浴搅拌溶解，于冰水中冷却使基质凝固，滤过，再向基质中加甲醇，滤液置于50mL量瓶中并加甲醇稀释至刻度，冷冻2小时以上，快速过滤后，进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长220nm处检测左炔诺孕酮（C₂₁H₂₈O₂)和炔雌醇（C₂₀H₂₄O₂)和内标醋酸甲地孕酮的吸收值，计算出其含量。

乙腈

1. 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论板数按左炔诺孕酮峰计算应不低于 5000。左炔诺孕酮峰与内标峰的分离度应符合要求。

1.3 紫外吸收检测器

2. 色谱条件

2.1 流动相：乙腈 水= 60 40

2.2 检测波长：220nm

2.3 柱温：室温

1. 称取供试品

取本品20丸，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于左炔诺孕酮0.75mg)，置10mL量瓶中。

2. 对照品溶液的制备

精密称取左炔诺孕酮和炔雌醇对照品适量，用乙腈溶解并定量稀释制成每1mL中约含有左炔诺孕酮0.75mg与炔雌醇0.15mg的溶液，精密量取此溶液与内标溶液各1mL，置10mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得。

3. 内标溶液的制备

取醋酸甲地孕酮适量，加乙腈稀释每1mL含1mg的溶液，即得。

4. 供试品溶液的制备

上述供试品置10mL量瓶中，精密加入内标溶液1mL，加流动相适量，超声处理使溶解，放冷，用流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，即得供试品溶液。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

分别精密吸取上述对照品溶液和供试品溶液的续滤液20μL 注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长220nm处测定左炔诺孕酮和炔雌醇及内标醋酸甲地孕酮的吸收值，按内标法以峰面积分别计算左炔诺孕酮和炔雌醇的含量，即得。

中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005年版，二部，p424。