复方呋塞米片—呋塞米与盐酸阿米洛利的测定—高效液相色谱法

本方法采用高效液相色谱法测定复方呋塞米片中呋塞米与盐酸阿米洛利的含量。

本方法适用于复方呋塞米片。

供试品经超声提取后，制成流动相溶液，进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长286nm处检测呋塞米与盐酸阿米洛利的吸收值，计算出其含量。

1. 甲醇

2. 磷酸缓冲液

1. 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按呋塞米峰计算不低于2000。呋塞米峰与盐酸阿米洛利峰的分离度应符合要求。

1.3 紫外吸收检测器

2. 色谱条件

2.1 流动相：水 甲醇 磷酸缓冲液=50 49 1

2.2 检测波长：286nm

2.3 柱温：室温

1. 磷酸缓冲液

取磷酸二氢钾13.6g，加水80mL，用磷酸调节pH值至3.0，用水稀释至100mL。

2. 称取供试品

取本品20片，精密称定，研细，精密称取约适量（约相当于呋塞米40mg与盐酸阿米洛利5mg)。

3. 对照品溶液的制备

精密称取盐酸阿米洛利对照品适量，精密称定，用甲醇溶解并稀释成每1mL约含1 mg的溶液，作为对照品溶液（1)。

精密称取呋塞米对照品40mg，置200mL量瓶中，加甲醇15mL与0.1mol/L盐酸溶液2mL，超声处理15分钟，放冷，在精密加入对照品溶液（1)5mL，用流动相稀释至刻度，摇匀，即得。

4. 供试品溶液的制备

将上述供试品置于200mL量瓶中，加甲醇15mL和0.1mol/L盐酸溶液2mL，超声处理15分钟，放冷，用流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，即得。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

分别精密吸取上述对照品溶液与供试品溶液各20μL 注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长286nm处测定呋塞米与盐酸阿米洛利的吸收值，计算出其含量。

中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005年版，二部，p.427。