复方盐酸阿米洛利片—盐酸阿米洛利和氢氯噻嗪的测定—高效液相色谱法

本方法采用高效液相色谱法测定复方盐酸阿米洛利片中盐酸阿米洛利和氢氯噻嗪的含量。

本方法适用于复方盐酸阿米洛利片。

供试品加甲醇超声提取后，制成水溶液，进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长286nm处检测盐酸阿米洛利和氢氯噻嗪的吸收值，计算出其含量。

1. 甲醇

2. 磷酸缓冲液

1. 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按炔诺酮峰计算不低于2000。炔诺酮与炔雌醇峰的分离度应符合要求。

1.3 紫外吸收检测器

2. 色谱条件

2.1 流动相：磷酸缓冲液 甲醇 水=4 25 71

2.2 检测波长：286nm

2.3 柱温：室温

1. 磷酸缓冲液

取磷酸二氢钾13.6g，加水80mL溶解后，加磷酸调节pH值至3.0，再加水至100mL)

2. 称取供试品

取本品10片，精密称定，研细，精密称取约适量（约相当于盐酸阿米洛利5mg)。

3. 对照品溶液的制备

精密称取盐酸阿米洛利对照品适量，用甲醇溶解并定量稀释制成每1mL中约含有盐酸阿米洛利1mg的溶液。精密称取氢氯噻嗪对照品100mg，置100mL量瓶中，加甲醇20mL使溶解，并加盐酸阿米洛利对照品溶液10mL，加0.1mol/L盐酸溶液4mL，用水稀释至刻度，摇匀，即得。

4. 供试品溶液的制备

将上述供试品置于50mL量瓶中，加甲醇15mL与0.1mol/L盐酸溶液2mL，超声处理使溶解，放冷，用水稀释至刻度，摇匀，滤过，即得。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

分别精密吸取上述对照品溶液与供试品溶液各10μL 注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长286nm处测定盐酸阿米洛利和氢氯噻嗪的吸收值，计算出其含量。

中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005年版，二部，p.432。