盐酸纳洛酮注射液—盐酸纳洛酮的测定—高效液相色谱法

本方法采用高效液相色谱法测定盐酸纳洛酮注射液中盐酸纳洛酮（C₁₉H₂₁NO₄·HCl)的含量。

本方法适用于盐酸纳洛酮注射液。

供试品加流动相溶解并定量稀释，进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长229nm处检测盐酸纳洛酮吸收值，计算出其含量。

1. 辛烷磺酸钠溶液

2. 甲醇

3. 磷酸

4. 稀释剂

1. 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数以盐酸纳洛酮峰计算不低于2000。

1.3 紫外吸收检测器

2. 色谱条件

2.1 流动相：辛烷磺酸钠 甲醇 磷酸=580 420 1

2.2 检测波长：229nm

2.3 柱温：室温

3. 系统适应性试验

称取150mg乙二胺四醋酸二钠置2000mL量瓶中，加0.9mL盐酸，用水溶解并稀释至刻度，摇匀作为稀释剂。取盐酸纳洛酮对照品与乙酰氨基酚对照品适量，用稀释剂溶解并稀释制成每1mL中含盐酸纳洛酮对照品20μg和对乙酰氨基酚2.5μg的溶液作为系统适用性试验溶液。精密量取系统适用性试验用溶液20μL，注入液相色谱仪，记录色谱图。对乙酰氨基酚色谱峰与盐酸纳洛酮的色谱峰的分离度应不小于8。

1. 辛烷磺酸钠溶液

称取1.36g1-辛烷磺酸钠，1.0g氯化钠，加水580mL溶解。

2. 稀释剂：

150mg乙二胺四醋酸二钠置2000mL量瓶中，加0.9mL盐酸，用水溶解并稀释至刻度，摇匀作为稀释剂。

3. 称取供试品

精密量取本品适量（约相当于盐酸纳洛酮2mg)，置200mL量瓶中。

4. 对照品溶液的制备

精密称取10mg，置100mL量瓶中，加稀释剂稀释至刻度，摇匀，精密量取1mL置10mL量瓶中，加稀释剂稀释至刻度，即得。

5. 供试品溶液的制备

将供试品用稀释剂溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，即得。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

分别精密吸取上述对照品溶液与供试品溶液各100μL 注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长229nm处测定纳洛酮的吸收值，计算出其含量。

中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005年版，二部，p.525。