氧氟沙星眼膏—氧氟沙星的测定—高效液相色谱法

本方法采用高效液相色谱法测定氧氟沙星眼膏中氧氟沙星（C₁₈H₂₀FN₃O₄)的含量。

本方法适用于氧氟沙星眼膏。

供试品加0.1mol/L盐酸溶液溶解并定量稀释，进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长294nm处检测氧氟沙星吸收值，计算出其含量。

1.乙腈

2.醋酸铵高氯酸钠溶液：取醋酸铵4.0g，高氯酸钠7.0g，加水1300mL使溶解，用磷酸调节pH值至2.2。

1.仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按氧氟沙星峰计算不低于5000，紧邻氧氟沙星峰前的杂质峰与氧氟沙星的分离度应符合要求。

1.3 紫外吸收检测器

2.色谱条件

2.1 流动相：醋酸铵高氯酸钠溶液 乙腈=85 15

2.2 检测波长：294 nm

2.3 柱温：室温

5.1 称取供试品

取本品2g，精密称定。

5.2 对照品溶液的制备

精密称取氧氟沙星对照品适量，加0.1mol/L盐酸溶液溶解并制成每1mL含0.12mg的溶液，摇匀，即得。

5.3 供试品溶液的制备

将供试品加石油醚（60~90℃)40mL使溶解，用0.1mol/L盐酸溶液提取3次，每次15mL，合并提取液至50mL量瓶中，加0.1mol/L盐酸溶液稀释至刻度，摇匀，即得。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

分别精密吸取上述对照品溶液与供试品溶液各10μL 注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长294nm处测定氧氟沙星的吸收值，以外标法计算出其含量，即得。

中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005年版，二部，p.607。