硝酸毛果芸香碱滴眼液—硝酸毛果芸香碱的测定—高效液相色谱法

本方法采用高效液相色谱法测定硝酸毛果芸香碱滴眼液中硝酸毛果芸香碱（C₁₁H₁₆N₂O₂·HNO₃)的含量。

本方法适用于硝酸毛果芸香碱滴眼液中硝酸毛果芸香碱的含量测定。

取本品适量，置于50mL量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，精密量取该溶液与内标溶液各10mL，置50mL量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，取20μL注入液相色谱仪，记录色谱图；另取硝酸毛果芸香碱对照品适量，精密称定，同法测定。按内标法以峰面积计算，即得。

1. 甲醇

2. 稀醋酸

3. 醋酸钠

1. 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论板数按硝酸毛果芸香碱峰计算应不低于1000。

1.3 紫外吸收检测器

2. 色谱条件

2.1 流动相：甲醇＋水溶液（含2.94g醋酸钠和38.4mL稀醋酸)= 400 600

2.2 检测波长：230nm

2.3 柱温：室温

1.稀醋酸

取冰醋酸60mL，加水稀释至1000mL，即得。

2. 对照品溶液的制备

精密称取硝酸毛果芸香碱对照品50mg，置于50mL量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，为对照品溶液。

3. 内标溶液的配制

精密量取苯甲酸，加流动相溶解并稀释制成每1mL中含90μg的溶液，摇匀，为内标溶液。

4. 供试品溶液的制备

精密称取本品适量（约相当于硝酸毛果芸香碱50mg)，置于50mL量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，为供试品溶液。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

精密量取供试品溶液与内标溶液各10mL，置50mL量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，精密吸取上述溶液20μL注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长230nm处测定硝酸毛果芸香碱的吸收值，另精密量取对照品溶液与内标溶液各10mL同上处理，测定。计算出其含量。

中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005年版，二部，p707。