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氯霉素眼膏—氯霉素的测定—高效液相色谱法

医药数据库中心 药学论坛 氯霉素眼膏—氯霉素的测定—高效液相色谱法
方法名称:
氯霉素眼膏—氯霉素的测定—高效液相色谱法
应用范围:

本方法采用高效液相色谱法测定氯霉素眼膏中氯霉素 (C11H12 Cl2N2O5)的含量。

本方法适用于氯霉素眼膏中氯霉素的含量测定。

方法原理:

取本品适量,加石油醚溶解,用磷酸缓冲液(pH6.0)提取后,取适量用流动相定量稀释制成每1mL中约含氯霉素0.10mg的溶液,注入液相色谱仪,在272nm波长处检测,记录色谱图。另取氯霉素对照品适量,同法测定,按外标法以峰面积计算,即得。

试剂:

1. 甲醇

2. 0.1%庚烷磺酸钠溶液

取0.1%庚烷磺酸钠溶液500mL二甲基甲酰胺5mL、冰醋酸0.5mL,混匀。

3. 二甲基甲酰胺

4. 冰醋酸

5. 石油醚

6. 磷酸缓冲液(pH6.0)

仪器设备:

1. 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,理论塔板数按氯霉素峰计算不低于2500。

1.3 紫外吸收检测器

2. 色谱条件

2.1 流动相:0.1%庚烷磺酸钠溶液+乙腈=75 25

2.2 检测波长:272nm

2.3 柱温:室温

试样制备:
1. 0.1%庚烷磺酸钠溶液

取0.1%庚烷磺酸钠溶液500mL二甲基甲酰胺5mL、冰醋酸0.5mL,混匀。

2. 对照品溶液的制备

精密称取氯霉素对照品适量,按氯霉素每10mg加甲醇1mL使溶解后,用流动相定量稀释制成每1mL中约含氯霉素0.10mg的溶液,摇匀,即为对照品溶液。

3.供试品溶液的制备

取本品约2g,精密称定,置分液漏斗中,加石油醚30mL,振摇,使基质溶解,加磷酸缓冲液(pH6.0)提取3次,每次20mL,合并提取液,置100mL量瓶中,加磷酸缓冲液(pH6.0)稀释至刻度,摇匀,精密称取适量,用流动相定量稀释成每1mL中约含0.10mg的溶液,即为供试品溶液。

注:“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

操作步骤:

分别精密量取供试品及对照品溶液10μL注入液相色谱仪,在272nm波长处检测,记录色谱图。按外标法以峰面积计算,即得。

参考文献:

中华人民共和国药典,国家药典委员会编,化学工业出版社,2005年版,二部,p.777。

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