磷酸苯丙哌林颗粒—磷酸苯丙哌林的测定—高效液相色谱法

本方法采用高效液相色谱法测定磷酸苯丙哌林颗粒中磷酸苯丙哌林的含量。

本方法适用于磷酸苯丙哌林颗粒。

供试品经处理后用流动相稀释成一定浓度的溶液，进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长270nm处检测磷酸苯丙哌林的吸收值，计算出其含量。

1. 甲醇（色谱纯)

2. 0.1mol/L醋酸铵缓冲液：7.7g醋酸铵溶于800mL水中，用冰醋酸调节pH为3.3，用水稀释至1000mL

3. 2％氢氧化钠溶液

4. 4%磷酸溶液

1. 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论板数按磷酸苯丙哌林峰计算应不低于 2000。

1.3 紫外吸收检测器

2. 色谱条件

2.1 流动相：甲醇：0.1mol/L醋酸铵缓冲液= 65 35

2.2 检测波长：270nm

2.3 柱温：室温

1. 对照品溶液的制备

取磷酸苯丙哌林适量，精密称定，加甲醇溶解并定量稀释成每1mL中约含0.4mg的溶液。

2. 供试品溶液的制备

取本品适量，混合均匀，精密称取适量（约相当于磷酸苯丙哌林20mg)。置50 mL量瓶中，加水20mL磷酸苯丙哌林溶解，加2％氢氧化钠溶液2.5mL，振摇1分钟生成白色浑浊液后，加4%磷酸溶液10mL使浑浊消失，加水稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液。

分别精密吸取上述对照品溶液与供试品溶液各10μL 注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长270nm处测定磷酸苯丙哌林的吸收值，计算出其含量。

中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005年版，一部，p875。