方法名称： |
复方黄连素片－盐酸小檗碱和盐酸巴马汀的测定－薄层扫描法 |
应用范围： |
本方法采用薄层扫描法测定复方黄连素片中盐酸小檗碱和盐酸巴马汀的含量。 本方法适用于中药制剂复方黄连素片。 |
方法原理： |
供试品去糖衣后的药粉置索氏提取器中，经甲醇加热回流，过滤，滤液定容，制成供试液，点样、展开，用薄层扫描仪进行扫描，于波长λS=430nm，λR=560nm测量盐酸小檗碱和盐酸巴马汀吸收度积分值，计算其含量。 |
试剂： |
1.甲醇 2. 正丁醇 3. 冰醋酸 |
仪器设备： |
1. 仪器 1.1 索氏提取器 1.2 薄层扫描仪 1.3涂布器 应能使吸附剂在玻璃板上手工或自动涂成一层符合厚度要求的均匀薄层。 1.4点样器 一般采用微升毛细管或与之相应的点样器材。 1.5展开室 可用适合薄层板大小的专用玻璃缸，底部平底或双槽，盖子须密闭。 2.材料 2.1玻板 用20cm×10cm的规格，要求光滑、平整，洗净后不附水珠，晾干。 2.2吸附剂 硅胶G，其颗粒大小一般要求直径为10～40μm。 |
试样制备： |
1. 对照品溶液的制备 精密称取盐酸小檗碱对照品适量，于25mL量瓶中，加甲醇制成1.008mg/mL的甲醇液作为盐酸小檗碱对照品溶液。 精密称取盐酸巴马汀对照品适量，于10mL量瓶中，加甲醇制成每1mL含0.534mg的甲醇液，作为盐酸巴马汀对照品溶液。 2. 供试品溶液的制备 精密称取供试品去除糖衣后研碎的细粉（过五号筛-80目)约1g，置索氏提取器中，加甲醇回流提取至无色（约16h)，定容于100mL量瓶中，作为测定盐酸小檗碱的供试品溶液。 另精密称取供试品去除糖衣后研碎的细粉（过五号筛-80目)约2.5g，置索氏提取器中，加甲醇回流提取至无色（约16h)，定容于50mL量瓶中，作为测定盐酸巴马汀的供试品溶液。 注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。 |
操作步骤： |
1.薄层板制备 将吸附剂1份和0.7%CMC-Na 3份在研钵中向一方向研磨混合，去除表面的气泡后，倒入涂布器中，在玻板上平稳地移动涂布器进行涂布（厚度为0.5mm)取下涂好薄层的玻板，于室温下，置水平台上晾干，在反射光及透射光下检视，表面应均匀，平整，无麻点、无气泡、无破损及污染，于110℃烘30分钟，冷却后立即使用或置干燥箱中备用。 2.点样 精密吸取供试品溶液和对照品溶液2μL，分别交叉点于同一硅胶G薄层板上，如用点样器点样到薄层板上，一般为圆点，点样基线距底边1.0～1.5cm，样点直径一般不大于2mm，点间距离可视斑点扩散情况，以不影响检出为宜。点样时必须注意勿损伤薄层表面。 3.展开 将点好样品的薄层板放入展开缸的展开剂中，以正丁醇-冰醋酸-水（7:1:2)溶液为展开剂展开，取出薄层板，晾干。 4. 标准曲线绘制 用定容毛细管精密吸取盐酸小檗碱对照品溶液和盐酸巴马汀对照品溶液1，2，3，4，5μL，点样，展开显色后，扫描测定，以点样量对积分面积绘制标准曲线，进行线性回归，得到回归方程。 5.含量测定 在薄层板上覆盖同样大小的玻璃板，周围用胶布固定，选择反射方式，采用吸收法，用双波长进行扫描，波长：λS =430nm，λR=560nm，测量供试品吸收度积分值与对照品吸收度积分值，计算。 用外标法测定时，若对照品各数据点在校正曲线上呈一通过原点的直线时，可用一点法校正，如不通过原点通常宜采用二点法校正，必要时用多点法校正。 |
参考文献： |
甄汉深，陈勇，戴善光. 薄层扫描法测定复方黄连素片中盐酸小檗碱和盐酸巴马汀的含量. 中国中药杂志，1993，18（2)：96-98. |
