复方黄连素片—盐酸小檗碱的测定—高效液相色谱法

本方法采用高效液相色谱法测定复方黄连素片中盐酸小檗碱的含量。

本方法适用于中药制剂复方黄连素片。

供试品于量瓶中，加沸水溶解，放冷，滤过，滤液进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长263nm处检测盐酸小檗碱的吸收值，计算出其含量。

1. 乙腈（色谱纯)

2. 磷酸二氢钾

3. 庚烷磺酸钠

4. 磷酸

5. 三乙胺

1. 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

Nova-pak C₁₈色谱柱（250×4.6mm)（大连依利特公司)，理论板数按盐酸小檗碱峰计算为8998。

1.3 紫外吸收检测器

2. 色谱条件

2.1 流动相：乙腈 磷酸盐缓冲液[0.05mol/L磷酸二氢钾和0.05mol/L庚烷磺酸钠(1:1)]，= 40 60（含0.2%三乙胺)，用磷酸调pH3.0。

2.2 检测波长：263nm

2.3柱温：室温

1. 称取供试品

精密称取本品去糖衣后研细的药粉（过五号筛-80目)适量（约相当于盐酸小檗碱40mg)。

2. 对照品溶液的制备

精密称取盐酸小檗碱对照品10.0mg，置100mL量瓶中，加30%乙醇至刻度，混匀，精密量取2mL置10mL量瓶中，加沸水适量使溶解并稀释至刻度，混匀，制成每1mL含盐酸小檗碱0.1mg的储备溶液。

3. 标准溶液的制备

精密量取对照品储备溶液6，8，10，12，14mL，加水定容至25mL量瓶中，摇匀，作为绘制标准曲线的系列浓度标准溶液。

4.供试品溶液的制备

将供试品置100mL量瓶中，加沸水适量使溶解并稀释至刻度，混匀，滤过，精密量取续滤液5mL，置50mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，为供试品溶液。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

1. 标准曲线绘制

精密吸取上述标准溶液20μL注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长263nm处测定盐酸小檗碱的吸收值，以进样量对峰面积绘制标准曲线，进行线性回归，得到回归方程。

2. 供试品的测定

精密吸取供试品溶液20μL注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长263nm处测定盐酸小檗碱的吸收值，计算出其含量。

林绍乐，游贵君，郑纯. 中国药典2000年版一部复方黄连素片含量测定方法的改进. 海峡药学，2003，15（5)：57-58.