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复方丹参片—三七皂甙R1的测定—高效液相色谱法

医药数据库中心 药学论坛 复方丹参片—三七皂甙R1的测定—高效液相色谱法
方法名称:
复方丹参片—三七皂甙R1的测定—高效液相色谱法
应用范围:

本方法采用高效液相色谱法测定复方丹参片中三七皂甙R1的含量。

本方法适用于中药制剂复方丹参片。

方法原理:
供试品于锥形瓶中,加甲醇回流提取,过滤,滤液置中性氧化铝柱上,收集40%甲醇洗脱液,蒸干,残渣加甲醇溶解定容,过滤,滤液进入高效液相色谱仪进行色谱分离,用差示检测器,检测三七皂甙R1的吸收值,计算出其含量。
试剂:

1. 甲醇

2. 磷酸

3. 中性氧化铝(100-200目)

仪器设备:

1. 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

C18色谱柱(250×4.6mm,5μm)。

1.3 示差检测器

2. 色谱条件

2.1 流动相:甲醇 水(磷酸调pH4)= 54 46

2.2柱温:室温

试样制备:

1. 称取供试品

精密称取本品去糖衣后研细的药粉(过3号筛,50目)0.9g。

2. 对照品溶液的制备

精密称取三七皂甙R1对照品适量,用甲醇溶解制成每1mL含三七皂甙R10.4mg的对照品溶液。

3.供试品溶液的制备

取供试品置锥形瓶中,精密加入甲醇25mL,称定重量,回流提取1h,放冷,补足重量,滤过,精密量取续滤液15mL,置中性氧化铝柱(4g,0.9cm)上,加甲醇10mL洗脱,弃去洗脱液,再加40%甲醇60mL洗脱,收集洗脱液,蒸干,残渣加50%甲醇使溶解并定容于5mL量瓶,过滤,滤液为供试品溶液。

注:“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

操作步骤:

1. 标准曲线绘制

精密吸取上述对照品溶液2,4,6,8,10μL注入高效液相色谱仪,用示差检测器测定三七皂甙R1的响应值,以进样量对峰面积绘制标准曲线,进行线性回归,得到回归方程。

2. 供试品的测定

精密吸取供试品溶液10μL注入高效液相色谱仪,用示差检测器测定三七皂甙R1的响应值,计算出其含量。

参考文献:

邸峰,孙毅坤. 高效液相色谱法测定复方丹参片中三七皂甙R1的含量. 中国中药杂志,1996,21(11):672-673.

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