桂龙咳喘宁胶囊—肉桂酸的测定—高效液相色谱法 2

本方法采用高效液相色谱法测定桂龙咳喘宁胶囊中肉桂酸的含量。

供试品药粉于锥形瓶中，加内标溶液，加50%甲醇-水（磷酸调pH为3.0)溶液，浸泡超声后，放冷，滤过，滤液进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长278nm处检测肉桂酸的吸收值，计算出其含量。

1. 甲醇（色谱纯)

2. 磷酸

3. 三乙胺

1. 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

日本Inerstil ODS-3 C₁₈色谱柱（250×4.6mm，5μm)。

1.3 紫外吸收检测器

2. 色谱条件

2.1 流动相：甲醇 水 三乙胺 磷酸 = 70 30 0.2 0.05

2.2 检测波长：278nm

2.3柱温：室温

1. 称取供试品

精密称取本品药粉试样0.3g。

2. 内标溶液的制备

精密称取内标丹皮酚对照品适量，加流动相溶液配成0.4g/L的内标溶液。

3. 对照品溶液的制备

精密称取肉桂酸对照品10mg，置50mL量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，得肉桂酸对照品储备液。

4. 标准溶液的制备

分别精密量取0.5，1.0，2.0，3.0，5.0mL肉桂酸对照品储备液，分别置10mL量瓶中，各加1mL丹皮酚内标溶液，加流动相至刻度，混匀，作为绘制标准曲线的系列浓度标准溶液。

5.供试品溶液的制备

将供试品置25mL锥形瓶中，加内标溶液1.5mL，加50%甲醇-水（磷酸调pH为3.0)13.5 mL（称重)，摇匀，浸泡30分钟，超声25分钟，放冷，再称定重量，用50%甲醇-水（磷酸调pH为3.0)补足减失的重量，混匀，滤过，取续滤液为供试品溶液。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

1. 标准曲线绘制

精密吸取上述标准溶液20μL注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长278nm处测定肉桂酸的吸收值，以标准溶液浓度对供试品与内标峰的峰面积比值绘制标准曲线，进行线性回归，得到回归方程。

2. 供试品的测定

精密吸取供试品溶液20μL注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长278nm处测定肉桂酸的吸收值，计算出其含量。

刘传华，陈沪宁，刘师莲等. RP-HPLC测定桂龙咳喘宁胶囊中肉桂酸的含量. 中国中药杂志，2004，29（3)：276-277.