方法名称： |
急支糖浆—盐酸麻黄碱的测定—高效液相色谱法 |
应用范围： |
本方法采用高效液相色谱法测定急支糖浆中盐酸麻黄碱的含量。 本方法适用于中药制剂急支糖浆。 |
方法原理： |
供试品加氨水碱化后，用氯仿萃取，氯仿萃取液加稀盐酸提取，稀盐酸提取液加氢氧化钠调pH4，加水稀释，过滤，滤液进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长210nm处检测盐酸麻黄碱的吸收值，计算出其含量。 |
试剂： |
1. 乙腈（色谱纯) 2 .磷酸二氢钾 3 .三乙胺 4 .氨水 5 .盐酸 6 .氯仿 7. 氢氧化钠 |
仪器设备： |
1. 仪器 1.1 高效液相色谱仪 1.2 色谱柱 YMG C18分析柱（250×4.6mm，5μm) 1.3 紫外吸收检测器 2. 色谱条件 2.1 流动相：乙腈 0.02mol/L磷酸二氢钾溶液（含0.2%三乙胺，磷酸调pH2.7)= 5 100 2.2 检测波长：210nm 2.3柱温：室温 |
试样制备： |
1. 称取供试品 精密吸取本品10mL。 2. 对照品溶液的制备 精密称取盐酸麻黄碱对照品0.01035g，置50mL量瓶中，加0.01mol/L盐酸溶液并稀释至刻度，作为对照品储备液。 3. 标准溶液的制备 分别精密量取对照品储备液0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0mL置10mL量瓶中，加0.01mol/L盐酸溶液并稀释至刻度，混匀，作为绘制标准曲线的系列浓度标准溶液。 4.供试品溶液的制备 供试品置分液漏斗中，加15%氨水10mL，摇匀，用氯仿振摇提取4次（10，10，10，5mL)，合并氯仿提取液，用15%氨水5mL洗涤，水层再用氯仿5mL提取1次，合并氯仿液，用0.05mol/L盐酸溶液提取3次（10，5，5mL)，提取液置25mL量瓶中，用10%氢氧化钠溶液调pH至4，加水稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。 注：“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。 |
操作步骤： |
1. 标准曲线绘制 精密吸取上述标准溶液20μL注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长210nm处测定盐酸麻黄碱的吸收值，以标准溶液浓度对峰面积绘制标准曲线，进行线性回归，得到回归方程。 2. 供试品的测定 精密吸取供试品溶液20μL注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长210nm处测定盐酸麻黄碱的吸收值，计算出其含量。 |
参考文献： |
邓开英，秦剑，周祥敏. 高效液相色谱法测定急支糖浆中盐酸麻黄碱的含量. 中国中药杂志，2002，27（1)：32-34. |
