方法名称: |
香砂养胃丸—橙皮甙的测定—高效液相色谱法 |
应用范围: |
本方法采用高效液相色谱法测定香砂养胃丸中橙皮甙的含量。 本方法适用于中药制剂香砂养胃丸。 |
方法原理: |
供试品于圆底烧瓶中,加甲醇水浴回流提取,过滤,滤液进入高效液相色谱仪进行色谱分离,用紫外吸收检测器,于波长284nm处检测橙皮甙的吸收值,计算出其含量。 |
试剂: |
1. 甲醇(色谱纯) 2. 乙腈(色谱纯) |
仪器设备: |
1. 仪器 1.1 高效液相色谱仪 1.2 色谱柱 Nova-Pak C18色谱柱(150×3.9mm)。 1.3 紫外吸收检测器 2 色谱条件 2.1 流动相:5%甲醇 乙腈 = 85 15 2.2 检测波长:284nm 2.3 柱温:40℃ |
试样制备: |
1. 称取供试品 精密称取本品粉末(过50目筛)适量。 2. 对照品溶液的制备 精密称取橙皮甙对照品10.0mg,加甲醇溶解定容至100mL,作为对照品储备液。 3. 标准溶液的制备 取对照品储备溶液进行适度稀释得系列浓度范围为10-50μg/mL的标准溶液。 4. 供试品溶液的制备 将供试品置圆底烧瓶中,加适量甲醇,摇匀,置水浴上加热回流5h,过滤,滤液置250mL量瓶中,用甲醇定容,作为供试品溶液。 注:“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。 |
操作步骤: |
1. 标准曲线绘制 精密吸取上述标准溶液10μL注入高效液相色谱仪,用紫外吸收检测器,于波长284nm处测定橙皮甙的吸收值,以标准溶液浓度对峰面积绘制标准曲线,进行线性回归,得到回归方程。 2. 供试品的测定 分别精密吸取上述供试品溶液10μL注入高效液相色谱仪,用紫外吸收检测器,于波长284nm处测定橙皮甙的吸收值,计算出其含量。 |
参考文献: |
顾继红. 高效液相色谱法测定香砂养胃丸中橙皮甙的含量. 中国血液流变学杂志,2003,2(13):199-200. |