方法名称： |
注射用双黄连（冻干)－连翘甙的测定－薄层扫描法 |
应用范围： |
本方法采用薄层扫描法测定注射用双黄连（冻干)中连翘甙的含量。 本方法适用于中药制剂注射用双黄连（冻干)。 |
方法原理： |
供试品加甲醇超声处理，滤过，续滤液作为供试液，点样、展开，以10%硫酸乙醇溶液显色，用薄层扫描仪进行扫描，于波长λS=530nm测量连翘甙吸收度积分值，计算其含量。 |
试剂： |
1. 甲醇 2 .氯仿 3. 硫酸 4. 乙醇 |
仪器设备： |
1. 仪器 1.1 薄层扫描仪 1.2点样器 一般采用微升毛细管或与之相应的点样器材。 1.3展开室 可用适合薄层板大小的专用玻璃缸，底部平底或双槽，盖子须密闭。 2. 材料 高效硅胶G板。 |
试样制备： |
1. 对照品溶液的制备 精密称取连翘甙对照品0.62mg，加甲醇使溶解，并定容成2mL，制成每1mL各含0.31mg的溶液，作为对照品溶液。 2. 供试品溶液的制备 精密称取供试品粉末（过五号筛-80目)约1g，精密加25mL甲醇，超声处理20min，滤过，续滤液作为供试品溶液。 注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。 |
操作步骤： |
1. 点样 精密吸取供试品溶液10μL、对照品溶液2μL与5μL，分别交叉点于同一硅胶G薄层板上，如用点样器点样到薄层板上，一般为圆点，点样基线距底边1.0～1.5cm，样点直径一般不大于2mm，点间距离可视斑点扩散情况，以不影响检出为宜。点样时必须注意勿损伤薄层表面。 2. 展开 将点好样品的薄层板放入展开缸的展开剂中，以氯仿-甲醇（10:2)溶液为展开剂，展开至8～15cm时，取出薄层板，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在110℃加热至斑点显色清晰，取出，晾干。 3. 标准曲线绘制 精密吸取对照品溶液1，2，3，4，5μL，分别点于同一块薄层板上，展开显色后，扫描测定，以点样量对吸收度峰面积绘制标准曲线，进行线性回归，得到回归方程。 4. 含量测定 在薄层板上覆盖同样大小的玻璃板，周围用胶布固定，选择反射方式，采用吸收法，用单波长进行扫描，波长：λS =530nm，测量供试品吸收度积分值与对照品吸收度积分值，计算。 用外标法测定时，若对照品各数据点在校正曲线上呈一通过原点的直线时，可用一点法校正，如不通过原点通常宜采用二点法校正，必要时用多点法校正。 |
参考文献： |
刘杰，陈卓，马开. 薄层扫描法测定双黄连制剂中连翘甙的含量. 中成药，1999，21（8)：394-396. |
