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复方灵芝降糖胶囊及灵芝—灵芝酸B的测定—高效液相色谱法

医药数据库中心 药学论坛 复方灵芝降糖胶囊及灵芝—灵芝酸B的测定—高效液相色谱法
方法名称:
复方灵芝降糖胶囊及灵芝—灵芝酸B的测定—高效液相色谱法
应用范围:

本方法采用高效液相色谱法测定复方灵芝降糖胶囊及灵芝中灵芝酸B的含量。

本方法适用于复方灵芝降糖胶囊及灵芝科真菌赤芝Ganoderma lucidum紫芝Ganoderma japonicum的干燥子实体。

方法原理:

取供试品置索氏提取器中,加氯仿提取,提取液蒸干溶剂,残渣加甲醇溶解并定容,摇匀,经0.45滤膜滤过,滤液作为供试品溶液。注入高效液相色谱仪,以紫外检测器检测,检测波长为254nm,记录灵芝酸B的响应值,计算其含量。

试剂:

1. 甲醇

2. 乙腈

3. 氯仿

仪器设备:

1 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

E. Merk Lichrospher (250 ×4mm, 5μm)。

1.3紫外检测器

2 色谱条件

2.1 流动相: 甲醇 0.5%高氯酸 = 50 50

2.3 柱温:40℃

2.4 检测波长:254

2.5 流速:0.7mL/min

试样制备:

1.称取供试品

复方灵芝降糖胶囊内容物研碎,精密称取粉末0.5g;精密称取过40目筛80℃下干燥6小时的灵芝药材0.5g。

2.对照品溶液的制备

精密称取灵芝酸B对照品适量于10mL容量瓶中,以甲醇溶解稀释至刻度,得到浓度为0.16mg/mL的对照品溶液。

3.供试品溶液的制备

取供试品置索氏提取器中,加80mL氯仿提取4小时,提取液蒸干溶剂,残渣加甲醇溶解并定容至2mL,摇匀,经0.45滤膜滤过,滤液作为供试品溶液。

注:“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

操作步骤:

1. 标准曲线的绘制

精密吸取上述对照品溶液1、2、3、5、7μL注入高效液相色谱仪进行色谱分离,用紫外检测器检测器,于254nm检测灵芝酸B吸收值,以灵芝酸B的进样量对灵芝酸B的峰面积绘制标准曲线,进行线性回归,得到回归方程。

2. 供试品的测定

精密吸取上述供试品溶液8μL入高效液相色谱仪进行色谱分离,用紫外检测器检测器,于254nm检测灵芝酸B吸收值,计算出其含量。

参考文献:

丁平,曾元儿,赖小平等. 复方灵芝降糖胶囊中灵芝酸B的含量测定. 中成药,1999,21(11):566-568.

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