方法名称： |
桂林西瓜霜喷雾剂—盐酸小檗碱的测定—高效液相色谱法 |
应用范围： |
本方法采用高效液相色谱法测定桂林西瓜霜喷雾剂中盐酸小檗碱的含量。 本方法适用于中成药桂林西瓜霜喷雾剂。 |
方法原理： |
供试品置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇后，超声提取，滤过,续滤液用乙醇稀释后用流动相制成供试品溶液，吸取20μL进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长345nm处检测盐酸小檗碱的吸收值，计算出其含量 |
试剂： |
1.乙腈（色谱纯) 2.甲醇（色谱纯) 3.磷酸二氢钠 |
仪器设备： |
1仪器 1.1高效液相色谱仪 1.2色谱柱 Inertsil-ODS-3（5μm，250mm×4.6mm) 1.3紫外吸收检测器 2色谱条件 2.1流动相：甲醇 乙腈 0.05mol/L磷酸二氢钠 = 20 30 50 2.2检测波长：345nm |
试样制备： |
1.称取供试品 精密称取供试品内容物4g。 2.对照品溶液的制备 精密称取经105℃干燥至恒重的盐酸小檗碱对照品适量，置25mL量瓶中，用甲醇溶解并稀释到刻度，摇匀，精密量取5mL,置50mL量瓶中，加乙醇至刻度，摇匀，即得每1mL含盐酸小檗碱40.76μg的对照品溶液。 3.标准溶液的制备 精密吸取对照品溶液0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL置于10mL量瓶，分别用流动相稀释至刻度，摇匀，作为绘制标准曲线的系列标准溶液。 4.供试品溶液的制备 将上述供试品置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50mL，称定重量，超声处理30min，时时振摇，放冷；再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，放置，滤过。精密量取续滤液5mL,置入50mL量瓶中，加乙醇至刻度，摇匀；精密量取2mL置10mL量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，作为供试品溶液。 注：“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。 |
操作步骤： |
1.标准曲线的绘制 精密吸取5.3项下的标准曲线测定溶液20μL注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长345nm处测定盐酸小檗碱的吸收值，以盐酸小檗碱峰面积为纵坐标，对照品溶液浓度为横坐标，绘制标准曲线。 2.供试品的测定 取供试品溶液20μL注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长345nm处测定盐酸小檗碱的吸收值，计算出其含量。 |
参考文献： |
金阳. HPLC法测定桂林西瓜霜喷雾剂中盐酸小檗碱的含量.现代中药研究与实践，2004,18(2):34-35 |
