止喘灵注射液—东莨菪碱的测定—高效液相色谱法

本方法采用高效液相色谱法测定止喘灵注射液中东莨菪碱的含量。

本方法适用于止喘灵注射液的测定。

供试品用氨试液调PH值，用氯仿提取3次，合并氯仿液水浴浓缩至干，残渣用甲醇溶解得供试液。进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长210nm处检测东莨菪碱的吸收值，计算出其含量。

1.甲醇（色谱纯)

2.氯仿

1 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

Hypersil（4.6mm×200mm,5μm)

1.3 紫外可见检测器

2 色谱条件

2.1 流动相：甲醇 水 = 78 22（含0.005%的十二烷基硫酸钠)

2.2 检测波长：210nm

2.3 柱温：25℃

1.称取供试品

精密量取供试品15mL。

2.供试品溶液的制备

将供试液置分液漏斗中，加氨试液调节PH=9，用氯仿提取3次（25、20、20mL)，合并氯仿液，置温水浴上回收氯仿至干，残渣加甲醇溶解并移至10mL容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，经离心处理（1200r/min)10min，即得供试品溶液。

3.对照品溶液的制备

精密称取氢溴酸东莨菪碱对照品15mg，置10mL容量瓶中，加甲醇适量使溶解，并稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备液（每1mL甲醇含氢溴酸东莨菪碱1.5mg)。

4.标准溶液的制备

精密吸取氢溴酸东莨菪碱对照品贮备液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4mL，分别置10mL容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为绘制标准曲线的系列标准溶液。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

1.标准曲线绘制

分别精密吸取上述系列浓度的标准溶液各20μL，依次注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长210nm处测定氢溴酸东莨菪碱的吸收值，以氢溴酸东莨菪碱的峰面积为纵坐标，以其浓度为横坐标，绘制标准曲线。

2.供试品测定

精密量取上清液20μL，注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长210nm处测定东莨菪碱的吸收值，计算出其含量。

刘建华，杨德柱. HPLC法测定止喘灵注射液中东莨菪碱的含量.中国中医药信息杂志，2004,11(7):609-610