麝香保心片-华蟾酥毒基和脂蟾毒配基的测定-高效液相色谱法

本方法采用高效液相色谱法测定麝香保心片中华蟾酥毒基和脂蟾毒配基的含量。

本方法适用于麝香保心片中华蟾酥毒基和脂蟾毒配基的含量测定。

供试品研细，加甲醇回流提取，滤过，续滤液进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长296nm处检测华蟾酥毒基和脂蟾毒配基的吸收值，计算出其含量。

1.乙腈（色谱醇)

2.二次重蒸水

3.磷酸二氢钾

4.五氧化二磷

5.甲醇

6.磷酸

1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按华蟾酥毒基峰计算为5500，按脂蟾毒配基峰计算为5000。二者与其它峰的分离度大于1.50。

1.3 紫外吸收检测器

2 色谱条件

2.1 流动相：0.5%磷酸二氢钾溶液一乙腈（45：55，用磷酸调节pH值为3.2)

2.2 检测波长：296nm

2.3 温度：40℃。

3 索氏提取器

1. 对照品溶液的制备

精密称取五氧化二磷减压干燥24 h的华蟾酥毒基，脂蟾毒配基对照品各l0mg，分别置100m1量瓶中，加甲醇溶解并稀释到刻度，摇匀；分别精密量取5m1，各置l0ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得每1ml中含华蟾酥毒基、脂蟾毒配基各50μg的对照品贮备溶液。

精密吸取2ml置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。

2. 供试品溶液的制备

取麝香保心片10片，研细，混匀，取约0. 4g，精密称定，加甲醇20m1，精密称定重量，加热回流1h，放冷，再称定重量，加甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

对照品溶液与供试品溶液进样前用微孔滤膜(孔径0.45μm)过滤。分别精密吸取上述对照品溶液与供试品溶液各20μL 注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长296nm处测定华蟾酥毒基和脂蟾毒配基的吸收值，计算出其含量。

世界科学技术-中药现代化，HPLC法测定麝香保心片中华蟾酥毒基和脂蟾毒配基的含量，2002，4(3)，p64。